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·真空離心濃縮儀在法醫(yī) DNA 樣本濃縮的應(yīng)用·

       濃縮作為微量疑難檢材提取中常用的方法，目前常用的有Amicon離心超濾管,、DNA Clean & Concen?trator-5 試劑盒,、Microcon-100 法等，以上濃縮均需在不同的管柱間轉(zhuǎn)移 DNA 模板,，不可避免造成 DNA 損耗,，同時(shí)增加了污染的概率。

      真空離心濃縮技術(shù)是改良的物理濃縮法,，其原理是利用離心力,、加熱和真空作用揮發(fā)液體，達(dá)到濃縮,、干燥 DNA 的目的,。在達(dá)到固定轉(zhuǎn)速后啟動(dòng)真空抽吸，揮發(fā)的液體回收至密閉容器,，有效避免樣品交叉污染和實(shí)驗(yàn)室污染,。該方法可同時(shí)濃縮多個(gè)樣品，通過(guò)去離子水量調(diào)節(jié)濃縮倍數(shù),，具有一定的簡(jiǎn)便性和靈活性,。

      48 份現(xiàn)場(chǎng)物證 DNA 模板經(jīng)真空離心濃縮儀濃縮 4.4 倍至 7.7 倍后,，獲得的圖譜分型峰高明顯提高。峰值均衡性改善,，判別出部分非特異性帶和假純合子,，等位基因數(shù)由 1334 個(gè)增加到 1942 個(gè)，有效分型樣本由 19 份增加到 27 份,。部分樣本圖譜質(zhì)量顯著改善（見(jiàn)圖 1）,。

        真空離心濃縮技術(shù)有以下特點(diǎn)：①濃縮時(shí)間相對(duì)短。45℃下,，恒溫混勻儀干燥 50μl 液體耗時(shí) 8小時(shí)以上,，真空離心濃縮技術(shù)僅需約 1 小時(shí)；②濃縮和回收液體均在密閉環(huán)境中,，降低實(shí)驗(yàn)室污染風(fēng)險(xiǎn),；③操作便捷，濃縮倍數(shù)靈活,，濃縮過(guò)程一管完成,，DNA 損耗少；④經(jīng)濟(jì)實(shí)用,。

      僅需一臺(tái)真空離心濃縮儀,，即可在現(xiàn)有的提取純化方法基礎(chǔ)上長(zhǎng)期應(yīng)用。真空離心濃縮技術(shù)適用于提取純化后模板體積較大,、抑制物少,、原檢驗(yàn)圖譜分型不理想的DNA 樣本濃縮，可以提高微量疑難檢材的檢驗(yàn)成功率,。

Hallan RVC2000C真空離心濃縮儀

       海朗Hallan真空離心濃縮儀可同時(shí)處理多個(gè)樣品,，無(wú)需擔(dān)心交叉污染。系統(tǒng)內(nèi)程序可設(shè)定至多36個(gè),，主機(jī)可根據(jù)不同的樣品對(duì)整機(jī)的真空度進(jìn)行調(diào)節(jié),，設(shè)備采用皮拉尼真空計(jì)可實(shí)時(shí)顯示腔體內(nèi)的真空度，并保證真空度的真實(shí)性,，真空設(shè)置范圍0.1~1000mbar，控制精度0.1mbar,。根據(jù)不同的樣品可對(duì)整機(jī)轉(zhuǎn)速進(jìn)行調(diào)節(jié),，更換轉(zhuǎn)子無(wú)需使用工具，且可與凍干系統(tǒng)聯(lián)用,。

   參考資料：doi:10.13618/j.issn.1001-5728.2019.05.010