培養(yǎng)基,,是指供給微生物,、植物或動物(或組織)生長繁殖的,由不同營養(yǎng)物質(zhì)組合配制而成的營養(yǎng)基質(zhì)。一般都含有碳水化合物,、含氮物質(zhì),、無機(jī)鹽(包括微量元素),、維生素和水等幾大類物質(zhì),。
滅菌是指用物理或化學(xué)的方法,殺死物體表面和孔隙內(nèi)的一切微生物或生物體,,即把所有生命的物質(zhì)全部殺死。
常用的滅菌方法可分為物理的和化學(xué)的兩類:物理方法如干熱(烘燒和灼燒),、濕熱(常壓或高壓蒸煮),、射線處理(超聲波、微波),、過濾,、清洗和大量無菌水沖洗等措施?;瘜W(xué)方法是使用甲醛,、過氧化氫、高錳酸鉀,、次氯酸鈉、抗菌素,、酒精化學(xué)藥品處理等,。
微生物檢查培養(yǎng)基常用的滅菌方法主要是濕熱滅菌和過濾除菌。
1,、濕熱滅菌:
蒸汽在冷凝時釋放出大量潛能,,并且蒸汽具有強(qiáng)大穿透力,蒸汽的濕熱破壞菌體蛋白質(zhì)和核酸的化學(xué)鍵,,使酶失活,,微生物因代謝障礙而死亡。濕熱滅菌的效果,,取決于致死溫度和致死時間,。致死溫度是殺滅微生物的極限溫度。致死時間是在致死溫度下殺滅全部微生物所需時間,。
高壓蒸汽滅菌適合于耐高溫培養(yǎng)基,、接種器械和蒸餾水的滅菌。培養(yǎng)基分裝后應(yīng)立即滅菌,,應(yīng)在當(dāng)天內(nèi)完成滅菌工作,,不可過夜,。消毒時間不宜過長,也不能超過規(guī)定的壓力范圍,,否則有機(jī)物質(zhì)就會在高溫下分解,,失去營養(yǎng)作用,也會使培養(yǎng)基變質(zhì),、變色,甚至難以凝固,。
2,、過濾除菌:
一些抗生素及有機(jī)物等,遇熱容易分解,,不能與培養(yǎng)基一起進(jìn)行高溫滅菌,,而要使用細(xì)菌過濾器濾去其中的雜菌,例如含抗生素的沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基,。過濾后的溶液要立即加入培養(yǎng)基中,,若為液體培養(yǎng)基,可在培養(yǎng)基冷卻至30℃時加入,;若為固體培養(yǎng)基,,必須在培養(yǎng)基凝固之前(50-60℃)加入,振蕩使溶液與其他成分混合均勻,。