高糖培養(yǎng)基不含酚紅是一種廣泛用于支持許多不同哺乳動物細胞生長的基礎培養(yǎng)基。在DMEM中成功培養(yǎng)的細胞包括原代成纖維細胞,、神經元,、膠質細胞、HUVECs和平滑肌細胞,,以及HeLa,、293、cos7和PC-12等細胞系,。
高糖培養(yǎng)基里面的葡萄糖怎么加,?
方法/步驟
1。與葡萄糖相比,,蔗糖有如下優(yōu)點:蔗糖是淀粉合成的前體物質,。在植物組織培養(yǎng)中蔗糖是較理想的碳源之一,其作用是作為碳源和維持滲透壓,。相關報道表明蔗糖對一些重要酶的基因表達及部分貯藏蛋白積累都具有重要影響,。如高濃度蔗糖可誘導淀粉結合淀粉合成酶(GBSS)基因的表達。
2.首先要明白葡萄糖是二糖,,也就是一個乳糖和另一個單糖縮合而成,,所以當你高溫高壓滅菌時,葡萄糖會分解,。
3.植物細胞培養(yǎng)中較常用的培養(yǎng)基的碳源是蔗糖,,已知葡萄糖和果糖也能使某些植物生長得很好。
4.如果你是搖瓶培養(yǎng)的話,,就按培養(yǎng)基成分進行配制,,在115℃,15min或者20min,,都可以,,如果是上罐的話,建議你分開滅菌,,就是先把培養(yǎng)基的其他成分都配好,,直接滅菌,葡萄糖單獨滅菌,,然后在通過蠕動泵加入 3如果你的培養(yǎng)基中有一些天然成分,,比如玉米漿等,工業(yè)上會采用121℃,,這樣做是為了使培養(yǎng)基滅透,,不至于染菌。
5.蔗糖是可以直接進入細胞的,、甘露糖和乳糖等.實在要添加葡萄糖那么滅菌溫度一般控制在108~110左右,,120度滅出來的就有一定程度的碳化了.葡萄糖更不穩(wěn)定,蔗糖跨質膜從質外體進入細胞是由載體介導并需要消耗能量的質子-蔗糖共運輸機制進行的半乳糖
6.雜交瘤細胞從培養(yǎng)基中吸收葡萄糖、氨基酸的主要方式是主動運輸,。
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