　　因?yàn)檠逯锌赡苡行┭a(bǔ)體和抗體,，是不是會(huì)影響轉(zhuǎn)染？我想未滅活的血清中含些抗體補(bǔ)體可能會(huì)和病毒相結(jié)合,，影響轉(zhuǎn)染,，正確嗎？細(xì)胞是單核細(xì)胞白血病細(xì)胞,，病毒是病毒包裝細(xì)胞PT67收集的病毒上清,。為什么要用無(wú)血清培養(yǎng)基加病毒孵育幾小時(shí)，目的是什么,？

　　答：血清一定要滅活,，可以先用無(wú)血清培養(yǎng)基加病毒孵育幾小時(shí)以后再加血清。避免雜蛋白對(duì)病毒和宿主結(jié)合過(guò)程的干擾,，一般是2-6小時(shí),，根據(jù)細(xì)胞的狀態(tài)決定。血清不一定需要滅活,，滅活的目的是將血清中的補(bǔ)體滅活 ,！這要根據(jù)實(shí)際情況而定，如果沒(méi)有把握那就滅活吧,，也不麻煩56度半個(gè)小時(shí),。

　　5,、問(wèn)：因?yàn)閷?shí)驗(yàn)室水浴鍋失控,，血清滅活時(shí)，溫度到了61.7℃,，這血清還能用嗎,？

　　答：多長(zhǎng)時(shí)間啊,？短時(shí)間應(yīng)該可以吧,，我有一次加熱了一個(gè)多小時(shí)，還照樣用,。

　　6,、問(wèn)：我滅活胎牛血清時(shí)，用的電磁爐,，定在了70℃,，本來(lái)說(shuō)調(diào)溫度到56℃再放血清的,，后來(lái)忘了，就把血清放進(jìn)去了,，所以滅活的溫度肯定超過(guò)56℃了,，不知道這樣對(duì)血清有沒(méi)有影響？

　　答：常規(guī)滅活建議的溫度在45℃到62℃之間,，而時(shí)間則從15分鐘到60分鐘不等,，其中常用的手法是56℃ 熱處理30分鐘?？纯茨沭B(yǎng)的細(xì)胞是什么,，一般的話估計(jì)問(wèn)題不大，要是很珍貴的細(xì)胞還是慎重一點(diǎn)啊,。熱滅活目的是為了去除血清中補(bǔ)體等對(duì)熱敏感的物質(zhì),，在對(duì)補(bǔ)體滅活以外，熱處理同時(shí)也對(duì)血清中可能存在的支原體具有滅活作用?，F(xiàn)在好像不主張熱滅活,，熱滅活經(jīng)常給血清產(chǎn)品帶來(lái)負(fù)面影響，對(duì)血清的加熱經(jīng)常導(dǎo)致血清中沉淀的產(chǎn)生,，此外 ,，有研究結(jié)果證實(shí)熱滅活步驟減弱了胎牛血清和小牛血清對(duì)細(xì)胞的促粘附作用。

　　胎牛血清主要用途：

　　牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量大的天然培養(yǎng)基,，含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)成份,，常用于動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng)，具有極為重要的功能,。

　　1.提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的激素,，基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒(méi)有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物，以及主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物,。

　　2. 提供結(jié)合蛋白,，能識(shí)別維生素、脂類,、金屬和其他激素等,，能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。

　　3.有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,，起到解毒作用,。

　　4.是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來(lái)源,。

　　5.起酸堿度緩沖液作用,。

　　6.提供蛋白酶抑制劑，使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活,，保護(hù)細(xì)胞不受傷害,。

胎牛血清使用中常見(jiàn)問(wèn)題的解答

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