一,、目的要求:
簡要介紹石蠟切片的制作和蘇木精、 曙紅染色法(簡稱H.E染色法),,借以了解石蠟切片制作的基本原理和一般方法,。
二,、實驗用具:
解剖器一套,、單面刀片、切片刀,、切片機,、載玻片、蓋玻片,、標本瓶,、燒杯、量筒,、漏斗,、染色缸、樹膠瓶,、酒精燈,、毛筆、繪圖紙,、濾紙,、熔蠟箱(或恒溫箱)、展片臺(或燙板),、小木塊、蠟帶盒,、烤片盒,、切片托盤、磁力攪拌器,。
三,、實驗材料:
蛙或小白鼠,。
四、實驗內容:
藥品:
1,、70%,、80%、90%,、95%酒精及*,。
2,、固定液
3,、蛋白甘油:蛋白甘油是粘貼蠟片用的粘片劑。配方如下:取一新鮮雞蛋的蛋白,,充分攪拌成雪花狀泡沫,,然后濾去泡沫,加入等量甘油,,使用磁力攪拌器攪拌均勻,,再加入一小粒麝香草酚防腐。因甘油粘度較大 所以須用大功率的磁力攪拌器,。梅穎浦的96-1大功率磁力攪拌器非合適本實驗,。
4,、染色液:以H.E.染色法為例,,需配制蘇木精染液和曙紅染液?! ?/p>
5,、鹽酸酒精:鹽酸酒精用于分色。配制方法是在100ml70%酒精中加入1ml鹽酸,?! ?/p>
6、其它:二甲苯,、切片石蠟,、中性樹膠等?! ?/p>
操作步驟:
石蠟切片法是zui常用的一種制片法,。其制作過程是:取材→固定→沖洗→脫水→透明→浸蠟→包埋→切片→貼片→烤片→脫蠟→復水→染色→脫水→透明→封藏。
五,、注意事項:
1,、制片是一個連續(xù)的操作過程,往往要連續(xù)幾天才能完成,,因此,,事先一定要制訂工作日程計劃,,應按順序進行工作。這樣可避免和其它工作發(fā)生沖突,,也不會因前后順序顛到或超過了規(guī)定的時間,,給工作帶來不必要的損失?! ?/p>
2,、制片的各個步驟都是互相關聯(lián)的,如脫水不*就會影響到透明的程度,,以至影響蠟塊的質量,。為此,必須對任何一個步驟,,都要細致,、嚴格進行操作?! ?/p>
3,、通過本實驗可了解到每張切片都是來之不易的,因此,,應倍加愛護,,不要損壞
VELP磁力攪拌器可廣泛應用于實驗室,是目前市場上zui安全可靠的攪拌器,,承載樣品量從250毫升到25升不等,,用于化學、生物技術,、制藥,、微生物和醫(yī)療等領域,培養(yǎng)微生物,,溶解營養(yǎng)和固體物質,,以及在滴定過程中防止懸浮物沉淀。
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