Annexin V-FITC/PI 細胞凋亡檢測試劑盒
MCE 國際站：Annexin V-FITC/PI Apoptosis Detection Kit
品牌：MedChemExpress (MCE)
存儲條件： -20℃ 保存一年。避光保存，避免反復(fù)凍融,。
簡介：MCE Annexin V-FITC/PI 細胞凋亡檢測試劑盒可方便,、快捷的檢測細胞凋亡。經(jīng) Annexin V-FITC 和 PI 聯(lián)合染色后,，正常細胞基本無熒光（Annexin V-/PI-）,，早期凋亡細胞呈綠色熒光（Annexin V+/PI-），晚期凋亡細胞及壞死細胞則呈綠色和紅色熒光（Annexin V+/PI+）,。
概述：MCE Annexin V-FITC/PI 細胞凋亡檢測試劑盒采用 FITC 標記的重組人Annexin V 檢測細胞凋亡,。在正常細胞中，磷脂酰絲氨酸 PS）位于細胞膜內(nèi)側(cè),；細胞凋亡早期,， PS 會外翻到細胞膜外側(cè)。 Annexin V （膜聯(lián)蛋白 V）是一種 Ca 依賴性磷脂結(jié)合蛋白,，可與 PS 特異性結(jié)合,，因此Annexin V 常作為檢測細胞早期凋亡的靈敏指標之一。Annexin V 經(jīng) FITC 標記后可發(fā)綠色熒光,，利用熒光顯微鏡或流式細胞儀可檢測細胞凋亡的發(fā)生,。此外，本試劑盒中的碘化丙啶（Propidium Iodide, PI）染色液是一種不能穿透細胞膜的紅色熒光染料,，可對凋亡晚期細胞及壞死細胞染色,。經(jīng) Annexin V-FITC 和 PI 聯(lián)合染色后，正常細胞基本無熒光（Annexin V-/PI-）早期凋亡細胞呈綠色熒光（Annexin V+/PI-）,，晚期凋亡細胞及壞死細胞則呈綠色和紅色熒光（Annexin V+/PI+）,。
描述：
MCE Annexin V-FITC/PI 凋亡檢測試劑盒提供了一種快速、方便的檢測細胞凋亡和壞死的方法,。在正?；罴毎校字＝z氨酸 (PS) 位于細胞膜的細胞質(zhì)表面,。在細胞凋亡開始時,，PS 從膜的內(nèi)層轉(zhuǎn)移到外層。Annexin V 是一種 35-36 kDa Ca2+ 依賴性磷脂結(jié)合蛋白,，對 PS 具有高親和力,。用綠色熒光 FITC 標記的 Annexin V 可以通過與外層暴露的 PS 結(jié)合來識別凋亡細胞。碘化丙啶 (PI) 是一種細胞膜不通透性染料,，對活細胞和早期凋亡細胞有效,，但對晚期凋亡細胞和壞死細胞則呈紅色熒光。染色后活細胞無熒光或僅有少量熒光（Annexin V-/PI-）,，早期凋亡細胞呈綠色熒光（Annexin V+/PI-）,，晚期凋亡細胞及壞死細胞呈紅色和綠色熒光（Annexin V+/PI+）,。
操作說明：1. 收集細胞： 收集 1-5 × 10 個細胞。懸浮細胞：1000 g 離心 5 min,，棄去上清,。加入 1 mL 預(yù)冷的 PBS 輕輕重懸細胞沉淀，1000 g 離心 5 min,，棄去上清,，保留細胞沉淀。貼壁細胞：小心吸取細胞培養(yǎng)液保存?zhèn)溆?。加?PBS 洗滌后,，加入適量胰酶消化液（盡量不含 EDTA，以免影響 Annexin V 和 PS 的結(jié)合）消化細胞,。加入前面收集的培養(yǎng)液,，輕輕吹打細胞，制成單細胞懸液,，1000 g 離心 5 min,，棄去上清。加入 1 mL 預(yù)冷的 PBS 輕輕重懸細胞沉淀,，1000 g 離心 5 min,，棄去上清，保留細胞沉淀,。2. 加入 195 μL Binding Buffer,，輕輕重懸細胞。3. 加入 5 μL Annexin V-FITC,，輕輕混勻,。4. 加入 10 μL PI Stain，輕輕混勻,。5. 室溫下避光孵育 10-20 min。注： 孵育過程中可輕輕顛倒數(shù)次以加強染色效果,。6. 檢測與分析流式細胞儀檢測：用流式細胞儀檢測熒光強度,。注：a. 流式檢測時，F(xiàn)ITC 最大激發(fā)波長為 488 nm,，最大發(fā)射波長為 525 nm,，在 FL1 通道檢測；PI-DNA 最大激發(fā)波長為 535 nm,，最大發(fā)射波長為 617 nm,，在 FL2 或FL3 通道檢測。b. 建議設(shè)置三組對照：未染色組,、PI 單染組及 Annexin V-FITC 單染組,。熒光顯微鏡檢測：1000 g 離心 5 min,，棄去上清，加入 50-100 μL Binding Buffer 輕輕重懸細胞沉淀,，涂片后用熒光顯微鏡檢測熒光強度,。
注意事項：1. 熒光染料都存在淬滅的問題，染色后應(yīng)盡快檢測熒光強度,，且整個實驗過程盡量避光下進行,。2. 若使用胰酶處理貼壁細胞，應(yīng)盡可能地去除胰酶,，防止 Annexin V-FITC 降解從而導(dǎo)致染色失敗,。3. 流式細胞儀檢測時，若 Annexin V-FITC 單獨染色組出現(xiàn)較多 PI 假陽性細胞,，可用 PBS 將 Annexin V-FITC 稀釋 3-10 倍后再進行檢測,。4. Annexin V-FITC 和碘化丙啶（PI）均對人體有害，操作時務(wù)必小心,。5. 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學研究用,，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品,。6. 為了您的安全和健康,，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
銷售產(chǎn)品：PF-01247324 | PXYC1 | Crizanlizumab | Margatoxin | Clonidine | TMB | Mometasone furoate | U-73343 | NSC697923 | Dehydroglyasperin C
Trending products：Recombinant Proteins | Bioactive Screening Libraries | Natural Products | Dye Reagents | PROTAC | Isotope-Labeled Compounds
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