細(xì)胞凋亡檢測試劑盒 (Hoechst法)
MCE 國際站：Cell Apoptosis Analysis Kit (Hoechst staining)
品牌：MedChemExpress (MCE)
存儲條件：4oC 保存 6 個月或 -20oC 保存一年避光保存
簡介：MCE 細(xì)胞凋亡檢測試劑盒 (Hoechst 法) 采用 Hoechst 33258 染色的方法快速檢測細(xì)胞凋亡。
概述：MCE 細(xì)胞凋亡檢測試劑盒 (Hoechst 法) 采用 Hoechst 33258 染色的方法快速檢測細(xì)胞凋亡,。Hoechst 33258 是一種可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料,。細(xì)胞凋亡時，細(xì)胞膜通透性增強(qiáng),，染色質(zhì)發(fā)生固縮,，且凋亡細(xì)胞膜上的 p-糖蛋白泵功能受損而不能及時將 Hoechst 33258 排出細(xì)胞，故凋亡細(xì)胞經(jīng) Hoechst 33258 染色后熒光強(qiáng)度比正常細(xì)胞明顯增強(qiáng),。使用熒光顯微鏡檢測時,，正常細(xì)胞為弱藍(lán)色熒光，凋亡細(xì)胞為強(qiáng)藍(lán)色熒光,。本試劑盒常用于貼壁細(xì)胞,、懸浮細(xì)胞及組織切片的細(xì)胞凋亡檢測，染色快速方便,，最快僅需 25 分鐘即可完成,。
描述：
MCE 細(xì)胞凋亡分析試劑盒（Hoechst 染色）提供了一種快速、方便的檢測細(xì)胞凋亡的方法,。Hoechst 33258 是一種藍(lán)色熒光染料（與 dsDNA 結(jié)合時激發(fā)/發(fā)射最大值 ≈ 352/461 nm）,，它使凋亡細(xì)胞中濃縮的染色質(zhì)比正常細(xì)胞中的染色質(zhì)更亮。它在凋亡細(xì)胞中顯示強(qiáng)藍(lán)色熒光,，但在正常細(xì)胞中僅顯示微弱熒光,。
操作說明：貼壁細(xì)胞1. 取一潔凈蓋玻片，用 70% 乙醇浸泡 5 min，無菌超凈臺中吹干備用,。注：也可將蓋玻片用無菌 PBS 或 0.9% NaCl 洗滌三次,，再用細(xì)胞培養(yǎng)液洗滌一次后備用。2. 將蓋玻片置于六孔板,，接種細(xì)胞,，培養(yǎng)至細(xì)胞密度約 50-80%3.刺激細(xì)胞發(fā)生凋亡。棄去培養(yǎng)液,加入0.5mL Fixative Solution,室溫固定10 min 以上,。注:4℃ 固定過夜效果更佳,。4.棄去 Fixative Solution,加入PBS 或 0.9% NaCI洗滌兩次,每次3min。5.加入0.5 mL Hoechst 33258 Stain,染色5min,。6.棄去染色液,用 PBS 或0.9% NaCI洗滌兩次,每次3min,。7.在載玻片上加一滴Antifade Mounting Medium,小心蓋上貼有細(xì)胞的蓋玻片。注意避免產(chǎn)生氣泡,。8. 熒光顯微鏡下檢測熒光強(qiáng)度,。注：Hoechst 33258 和雙鏈 DNA 結(jié)合后，最大激發(fā)波長為 352 nm,，最大發(fā)射波長為 461 nm,。懸浮細(xì)胞1.4°℃,1000 g 離心 3-5 min,收集10-10細(xì)胞。2.加入0.5 mL Fixative Solution,室溫固定10 min 以上,。注:4°℃ 固定過夜效果更佳,。3.4℃, 1000 g 離心 3-5 min,棄去Fixative Solution,加入PBS 或0.9% NaCl洗滌兩次,每次3min。4.加入約 50μL PBS或0.9% NaCI輕輕重懸細(xì)胞沉淀,并滴加至載玻片上,。5.室溫下晾干至細(xì)胞不會輕易隨液體流動,。6.加0.5 mL Hoechst33258 Stain,染色5min。7.棄去染色液,用 PBS 或0.9%NaCI洗滌兩次,每次3min,。8.在載玻片上加一滴Antifade Mounting Medium,小心蓋上蓋玻片,。注意避免產(chǎn)生氣泡。9.熒光顯微鏡下檢測熒光強(qiáng)度,。注:Hoechst 33258和雙鏈DNA結(jié)合后,最大激發(fā)波長為352 nm,最大發(fā)射波長為461 nm,。組織切片1.常規(guī)包埋切片后,將切片處理至可用于免疫組化染色。2.加入 PBS 或 0.9% NaCI洗滌兩次,每次3min,。3.加入0.5 mL Hoechst 33258 Stain,染色5min,。4.棄去染色液,用PBS 或0.9% NaCl洗滌兩次,每次3min。5.小心將切片置于載玻片上,加一滴Antifade Mounting Medium,小心蓋上蓋玻片,。注意避免產(chǎn)生氣泡,。6.熒光顯微鏡下檢測熒光強(qiáng)度。注:Hoechst 33258 和雙鏈DNA 結(jié)合后,最大激發(fā)波長為352 nm,最大發(fā)射波長為461 nm,。
注意事項(xiàng)：1. 熒光染料存在淬滅的問題,，染色后應(yīng)盡快檢測熒光強(qiáng)度。2. Hoechst 33258 對光敏感，整個實(shí)驗(yàn)過程盡量避光下進(jìn)行,。3. Hoechst 33258 對人體有害,，操作時務(wù)必小心。4. 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,，不得用于臨床診斷或治療,，不得用于食品或藥品。5. 為了您的安全和健康,，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作,。
銷售產(chǎn)品：Heterophyllin B | VU0155069 | Chicoric acid | Psoralen | GSK429286A | Sitagliptin (phosphate) | N3-PEG4-C2-NH2 | L-Cysteine (hydrochloride) | Teicoplanin | ISRIB
Trending products：Recombinant Proteins | Bioactive Screening Libraries | Natural Products | Dye Reagents | PROTAC | Isotope-Labeled Compounds
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