谷胱甘肽瓊脂糖磁珠
MCE 國際站:Glutathione Magnetic Agarose Beads
品牌:MedChemExpress (MCE)
存儲條件:4°C,,2 年
簡介:MCE Glutathione Magnetic Agarose Beads 可用于純化各表達系統(tǒng)表達的谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶,、谷胱甘肽依賴性蛋白和谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶的重組衍生物。
概述:MCE Glutathione Magnetic Agarose Beads 以磁性交聯(lián)瓊脂糖為基質(zhì),,表面共價偶聯(lián) GSH 配基,,可用于純化各表達系統(tǒng)表達的谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶、谷胱甘肽依賴性蛋白和谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶的重組衍生物,。本品儲存于 20%乙醇中,, MCE Glutathione Magnetic Agarose Beads 占懸浮液總體積的 20%,使用前需將產(chǎn)品充分重懸混勻后吸取,。本產(chǎn)品可通過磁力架(MCE 產(chǎn)品目錄號:HY-K0200)或自動分離儀器直接從生物樣品中一步純化出高純度的目標蛋白,,極大地簡化純化工藝和提高純化效率。MCE Glutathione Magnetic Agarose Beads 具有較高的 GST 標簽融合蛋白加載容量 (5-10 mg 蛋白/mL Settled Beads),,也可用于 GST-tag 蛋白的 Pull-down 實驗,。
描述:
MCE 谷胱甘肽磁性瓊脂糖珠基于磁性交聯(lián)瓊脂糖,可有效純化各種規(guī)模的高水平過表達 GST 標記融合蛋白,。 MCE 谷胱甘肽磁性瓊脂糖珠具有高蛋白質(zhì)結(jié)合能力和穩(wěn)定性,,使其成為大腸桿菌、酵母,、昆蟲和哺乳動物表達系統(tǒng)中表達的 GST 標記融合蛋白的高性能純化的理想選擇,。
• 方便省時。
• 低非特異性結(jié)合,。
• 樣品損失最小,。
• 蛋白質(zhì)結(jié)合能力高達 5-10 mg/mL 沉降珠。
• 穩(wěn)定,,一瓶解決方案,。
操作說明:GST 標簽蛋白純化(1) 瓊脂糖磁珠預處理混懸 Glutathione Magnetic Agarose Beads,根據(jù)樣品裂解液中 GST 融合蛋白的量吸取適量的瓊脂糖磁珠,,置于離心管中,,加入適量的平衡/洗滌緩沖液,充分混懸,,置于磁力架上磁性分離,,棄上清;重復以上洗滌步驟 2 次,。(2) 樣品的結(jié)合加入適量的樣品裂解液,,充分混懸,置于翻轉(zhuǎn)混合儀孵育 (室溫,,30 分鐘,;4℃,,1 小時),磁性分離,,收集瓊脂糖磁珠。上清液收集于新的離心管中,,以備后續(xù)檢測使用,。(3) 洗滌加入 2 倍瓊脂糖磁珠體積的平衡/洗滌緩沖液,充分混懸,,磁性分離,,棄上清。重復以上洗滌步驟 2 次,。(4) 洗脫加入 3-5 倍瓊脂糖磁珠體積的洗脫緩沖液,,充分混懸,置于翻轉(zhuǎn)混合儀或手工輕輕翻轉(zhuǎn)離心管,,室溫孵育 5-10 分鐘,。分離磁珠,收集上清至新的離心管,,即為洗脫完成的目的蛋白,,樣品用于后期功能分析。蛋白 Pull-Down 實驗(1) 瓊脂糖磁珠預處理混懸 Glutathione Magnetic Agarose Beads,,取 100 μL 瓊脂糖磁珠,,置于 1.5 mL EP管中,加入 500 μL 平衡/洗滌緩沖液,,充分混懸,,置于磁力架上磁性分離,棄上清,。重復以上洗滌步驟 2 次,。(2) 靶蛋白-瓊脂糖磁珠的結(jié)合a. 在上述分離得到的磁珠中加入 500 μL 含 GST 標簽的靶蛋白樣品,充分混懸,,置于翻轉(zhuǎn)混合儀孵育 (室溫,,30 分鐘;4℃,,1 小時),,磁性分離,棄上清,。b. 加入 1 mL 平衡/洗滌緩沖液,,充分混懸磁珠,磁性分離,,棄上清,,重復以上洗滌步驟 2 次,,得到 GST 融合蛋白-磁珠復合物。(3) 目標蛋白與 GST 融合蛋白-磁珠復合物的結(jié)合a. 加入 500 μL 含目標蛋白的樣品裂解液,,充分混懸,,置于翻轉(zhuǎn)混合儀孵育 (室溫,30 分鐘),,磁性分離,,收集瓊脂糖磁珠。上清液收集于新的 EP 管中,,以備后續(xù)檢測使用,。b. 在上述分離得到的磁珠中加入 1 mL 平衡/洗滌緩沖液,充分混懸磁珠,,磁性分離,,棄上清,重復以上洗滌步驟 2 次,。(4) 洗脫在上述 EP 管中加入 3-5 倍瓊脂糖磁珠體積的洗脫緩沖液,,充分混懸,置于翻轉(zhuǎn)混合儀或手工輕輕翻轉(zhuǎn)離心管,,室溫孵育 5-10 分鐘,。分離磁珠,收集上清至新的 EP 管,,即得到 GST 融合蛋白與目標蛋白的復合物,。
注意事項:(1) 本產(chǎn)品 pH 值為 6-8,禁止凍結(jié),。(2) 本產(chǎn)品應避免離心,、干燥或凍存,禁止長時間置于磁場,,可能會引起磁珠聚團,,降低結(jié)合活性。(3) 本產(chǎn)品可重復使用,,若純化不同種類蛋白時,,建議使用新的瓊脂糖磁珠。(4) 從磁珠保存管中移取磁珠前應充分振蕩混勻,,操作過程中動作應輕柔,,并避免產(chǎn)生氣泡。(5) 為最大限度的降低蛋白質(zhì)降解,,請配合使用 MCE 蛋白酶抑制劑 cocktails (MCE 產(chǎn)品目錄號:HY-K0010,,HY-K0011)。(6) 樣品及緩沖液中加入 1-10 mM 的 DTT,,有助于提高部分 GST 融合蛋白與瓊脂糖磁珠的結(jié)合,。(7) 如果目的蛋白沒有被洗脫下來,,可能原因為洗脫液中的還原型谷胱甘肽被氧化,因此建議使用新鮮配制的洗脫液,。(8) 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學研究用,,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,。(9) 為了您的安全和健康,,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
銷售產(chǎn)品:Pyrithione | 2-Hydroxybutyric acid | L-Glutamic acid | Trimethylamine N-oxide | Ociperlimab | Procyanidin B2 | IPR-803 | Micafungin (sodium) | DCLK1-IN-1 | Vitamin D3
Trending products:Recombinant Proteins | Bioactive Screening Libraries | Natural Products | Dye Reagents | PROTAC | Isotope-Labeled Compounds
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