蛋白L瓊脂糖
MCE 國際站:Protein L Agarose
品牌:MedChemExpress (MCE)
存儲條件:2-8°C,禁止凍結(jié),,2 年有效
簡介:MCE Protein L Agarose 是用于一步分離,、純化含 kappa 輕鏈抗體的親和層析介質(zhì)。
概述:MCE Protein L Agarose 是用于分離,、純化抗體的親和層析介質(zhì),。Protein L 最早發(fā)現(xiàn)于大消化鏈球菌(Peptostreptoccus magnus)細(xì)胞壁中,可通過 kappa 輕鏈和哺乳動物的免疫球蛋白結(jié)合,。重組 Protein L 含有 5 個免疫球蛋白(Ig)結(jié)合位點,。與 Protein A、Protein G 相比,,具有更廣譜的 Ig 結(jié)合能力,,幾乎可結(jié)合所有含有 kappa 輕鏈的 Ig(IgG、IgM,、IgA,、IgE 和 IgD)及單鏈可變片段(scFv)和 Fab 片段。MCE Protein L Agarose 以高度交聯(lián)的 4% 瓊脂糖凝膠為基質(zhì),,通過化學(xué)方法偶聯(lián)了重組 Protein L,,可從動物腹水、血清,、細(xì)胞分泌液上清等生物體液中一步分離,、純化 IgG 等。本品儲存于 20% 乙醇中,,每 1 mL 總體積中 0.5 mL 為凝膠,。使用前,需將 Protein L Agarose 充分重懸混勻后吸取,。
描述:
蛋白 L 是一種由大消化鏈球菌表達(dá)的免疫球蛋白 κ 輕鏈結(jié)合蛋白,。 Protein L 比 Protein A,、Protein G 能結(jié)合更廣泛的免疫球蛋白種類和亞類,能結(jié)合所有種類的免疫球蛋白(IgG,、IgM,、IgA、IgE 和 IgD),,也能結(jié)合單鏈可變區(qū)片段(Scfv)和 Fab 片段,。
MCE Protein L 瓊脂糖是一種 4% 高度交聯(lián)的瓊脂糖試劑,與重組 Protein L 偶聯(lián),,可有效純化具有 kappa 輕鏈的哺乳動物單克隆和多克隆抗體,。
特性 | |
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基質(zhì)球形 | 4% 交聯(lián)瓊脂糖 |
取代度 | 2 mg 重組蛋白 L/mL 沉降樹脂 |
珠子直徑 | 45-165 μm |
結(jié)合容量 | 20 mg 人 IgG/mL 沉淀樹脂 |
儲存溶液 | 50% 漿液,1× PBS,,含 20% 乙醇 |
操作說明:1. Buffer 的準(zhǔn)備建議用高純水配制 Buffer,,且配制后通過 0.45 μm 濾膜過濾除菌。2. 樣品處理:(1) 為了確??贵w樣本能夠高效結(jié)合在 Protein L Agarose 上,,需要用平衡緩沖液稀釋血清、腹水等,,比例至少為 1:1,;或者把樣本放在平衡緩沖液中透析過夜。(2) 樣品在上樣前離心或用 0.45 μm 濾膜過濾,,可減少雜質(zhì),、提高抗體純化效率、防止堵塞柱子,。3. Protein L Agarose 的裝填:(1) 用去離子水沖洗柱底篩板,,確保柱底篩板上無氣泡,關(guān)閉柱底出口,,并在柱底部留出 1-2 cm 的去離子水,。(2) 將 Protein L Agarose 懸浮混勻,小心地將漿液連續(xù)倒入柱管中,。用玻璃棒沿著柱壁倒入漿液可減少氣泡的產(chǎn)生,。(3) 打開柱底部出口,最初讓緩沖液緩慢流過層析柱,,然后緩慢增加至最終流速 1 mL/min,,這樣可避免液壓對所形成柱床的沖擊,也可以得到很好的裝填效果,。標(biāo)記柱床高度,。4. 樣品純化:(1) 平衡:使用至少 5 倍柱體積的平衡緩沖液平衡層析柱,讓緩沖液緩慢流出,流速大約為 1 mL/min,。(2) 上樣:利用泵或注射器上樣,。讓樣品緩慢流出,流速大約為 0.5-1 mL/min,,收集流出液,。如有必要,,可以重復(fù)或循環(huán)上樣以提高得率,。(3) 洗雜:用平衡緩沖液沖洗柱子,流速大約為 2 mL/min,,直到 OD280 紫外吸收達(dá)到一個穩(wěn)定的基線(一般 15-30 倍柱體積),,收集流出液。(4) 洗脫:洗雜完畢后,,用 10-15 倍柱體積的洗脫緩沖液洗脫柱子,,流速大約為 1 mL/min,收集洗脫液,,并立刻加入中和緩沖液(1/10 洗脫液體積)調(diào)節(jié) pH 到 7.4,。(3) SDS-PAGE 檢測:將純化得到的抗體樣品(包括流出組分、洗雜部分和洗脫部分)以及原始樣品使用 SDS-PAGE 檢測純化效果,。5. 填料再生:使用 10 倍柱體積的鹽酸胍溶液(6 M,,pH 8.0)或洗脫緩沖液清洗,然后立即用 5 倍柱體積的平衡緩沖液清洗,。Protein L Agarose 能夠重復(fù)再生 10 次,,而不會有明顯的吸附量下降。6. 填料儲存:Protein L Agarose 需保存在含有 20% 乙醇的平衡緩沖液中,,2-8°C 保存,,嚴(yán)禁凍結(jié)。
注意事項:1. 請勿干燥或冷凍本產(chǎn)品,,以免引起效價降低,,降低純化效率。2. Protein L 親和層析介質(zhì)的靜態(tài)吸附能力 >15 mg 人 IgG/mL 介質(zhì),,其動態(tài)吸附能力會受到目的抗體濃度,、上樣流速等因素影響而產(chǎn)生變化。3. 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,,不得用于臨床診斷或治療,,不得用于食品或藥品。4. 為了您的安全和健康,,請穿實驗服并戴一次性手套操作,。
銷售產(chǎn)品:Ginsenoside Rh2 | PMSF | GW3965 (hydrochloride) | Sodium 4-phenylbutyrate | 2-Hydroxy Atorvastatin-d5 (disodium) | Erlotinib | Elinzanetant | TBHQ | GSK2795039 | Relatlimab
Trending products:Recombinant Proteins | Bioactive Screening Libraries | Natural Products | Dye Reagents | PROTAC | Isotope-Labeled Compounds
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