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產(chǎn)地類別 | 國(guó)產(chǎn) | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 食品/農(nóng)產(chǎn)品,農(nóng)林牧漁 |
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一、鹽酸克倫特羅檢測(cè)試劑盒概要
克倫特羅(瘦肉精)是一種腎上腺受體激動(dòng)劑即神經(jīng)興fen劑,。80年代末期發(fā)現(xiàn)其對(duì)家畜具有促進(jìn)生長(zhǎng),降低脂肪,,提高瘦肉率的功效,,曾被作為飼料添加劑使用。然而,,90 年代初期以來,,出現(xiàn)多起克倫特羅(瘦肉精)中毒事件,并出現(xiàn)了死亡案例,,因此被禁止使用,。克倫特羅快速檢測(cè)試劑盒采用直接競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫一步法,,可對(duì)尿液,、飼料,、肉類組織中的克倫特羅進(jìn)行快速定量檢測(cè)。
二,、鹽酸克倫特羅檢測(cè)試劑盒原理
克倫特羅檢測(cè)試劑盒采用間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法檢測(cè)尿樣,、組織、飼料等樣本中的鹽酸克倫特羅(Clenbuterol Hydrochloride,,Cle),,試劑盒由預(yù)包被偶聯(lián)抗原的酶標(biāo)板、辣根酶標(biāo)記物,、抗體,、標(biāo)準(zhǔn)品及其他配套試劑組成。檢測(cè)時(shí),,加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品溶液,,樣本中的鹽酸克倫特羅和酶標(biāo)板上預(yù)包被偶聯(lián)抗原競(jìng)爭(zhēng)抗鹽酸克倫特羅抗體,加入酶標(biāo)記物后,,用TMB底物顯色,,樣本吸光度值與其所含鹽酸克倫特羅含量成負(fù)相關(guān),與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較即可得出樣本中鹽酸克倫特羅的殘留量,。
三,、使用范圍
克倫特羅檢測(cè)試劑盒可定性、定量檢測(cè)動(dòng)物組織(肌肉,、肝臟等),、尿液、飼料,、牛奶等樣品中克侖特羅的殘留量,。
四、技術(shù)指標(biāo)
1 試劑盒靈敏度:0.1ppb(ng/ml)
2 反應(yīng)模式:25℃,,30min~15min,。
3 檢測(cè)下限:
尿液樣本:0.1ppb 組織樣本:0.1ppb 飼料樣本:1ppb
4 交叉反應(yīng)率:
克倫特羅(Clenbuterol):100% 馬布特羅(Mabuterol):<1% 特普他林(Terbutalin):<1% 溴布特羅(Brombuterol):<1%
沙丁胺醇(Salbutamol):<1% 萊克多巴胺(Ractopamine):<1%
5 樣本回收率:
尿樣:95%±10% 組織:85%±15% 飼料:85%±15%
五、克倫特羅檢測(cè)試劑盒組成
酶標(biāo)板,、標(biāo)準(zhǔn)液,、高標(biāo)準(zhǔn)液、酶標(biāo)記物 ,、抗體工作液,、底物液A、底物液B,、終止液,、20X濃縮洗滌液、10X復(fù)溶液
六,、貯藏及保存期
儲(chǔ)藏條件:試劑盒于2-8℃保存,,不要冷凍,。
保 質(zhì) 期:該產(chǎn)品有效期為1年,生產(chǎn)日期見包裝盒,。
樣本前處理步驟:
尿樣處理方法:
取1ml清亮尿樣(渾濁尿樣需要過濾或經(jīng)4000r/min離心5min以得到清亮尿樣)于10ml離心管中,,加入1ml復(fù)溶液(配液1),混合振蕩30s,,取50µl進(jìn)行分析,。暫不使用的樣本應(yīng)冷凍保存。
樣本稀釋倍數(shù):2 檢測(cè)下限:0.1ppb
組織樣本處理方法:
稱取均質(zhì)后的組織樣本1g±0.05g,,加入3ml復(fù)溶液(配液1),,充分振蕩2min,室溫4000r/min以上離心10min (若組織樣本中油脂含量較高,,可在振蕩后放入85℃水浴10min后再離心),。取50µl上清液進(jìn)行分析。
樣本稀釋倍數(shù):4 檢測(cè)下限:0.2ppb
飼料樣本處理方法:
1)稱取粉碎后的飼料樣本1g±0.05g于15ml離心管中,,加入4ml樣本提取液(配液3),,振蕩混勻2min,室溫 4000r/min以上離心10min,;
2)取上清液0.1ml于1.5ml離心管中,,再加入0.4ml復(fù)溶液(配液1),,振蕩混勻30s,,取50ul分析。
樣本稀釋倍數(shù):20 檢測(cè)下限:1ppb
豬肝樣本處理辦法
1)稱取均質(zhì)后的豬肝樣本1g±0.05g于15ml離心管中,,加入1ml 10%碳酸鈉溶液(配液4),振蕩混勻2min,,加入4ml乙酸乙酯溶液,振蕩混勻5min,,室溫4000r/min以上離心10min,;
2)取上層有機(jī)液2ml于15ml離心管中,加入1ml 0.1M鹽酸溶液(配液5),,振蕩混勻2min,,室溫4000r/min以上離心5min;
3)取下層清液0.1ml于1.5ml離心管中,,加入0.4ml復(fù)溶液(配液1),,用2M 氫氧化鈉溶液(配液6)調(diào)PH至 7 左右,取50ul分析,。