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逸漠生物真空吸液儀（培養(yǎng)儀器）

一,、產品說明

逸漠生物真空吸液儀（培養(yǎng)儀器）

貨號SMP-100

規(guī)格425mm x 210mm x 160mm

貨期現(xiàn)貨

供應電源DC 12V 1.5A

大真空度213mbar / 80KPa / 600mmHg

抽液速率17ML/SEC

二,、細胞培養(yǎng)操作

收貨方式T25瓶凍存管

收貨處理觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁，將T25瓶置于37度培養(yǎng)箱放置2-4h，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)收到細胞后，需立即轉入液氮凍存或直接復蘇

傳代密度細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)第二天換液并檢查細胞密度

傳代比例傳代建議1：2傳代

1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿,。不是1個T25瓶傳2個10cm皿一管細胞建議接種到10cm培養(yǎng)皿或者T25瓶

傳代方法a,、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。

b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,，使消化液浸潤所有細胞,，棄去消化液，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1 min,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。

c、按6-8 mL/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后裝入無菌離心管中,，1000 rpm離心4 min，棄去上清液,，補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻,。

d、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。將含有1 mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液,，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入10 cm皿中，加入約8 mL培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜),。第二天換液并檢查細胞密度。

注意事項1.運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞,。

2.因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,，是正?，F(xiàn)象。1.收貨時若發(fā)現(xiàn)干冰化完,，檢查凍存管是否融化,，若已融化需直接離心細胞接種觀察,，若未融化可以將細胞按正常步驟保存;

2.為保證細胞的高存活率，收到產品后,，請立即解凍復蘇細胞,。

到貨須知1.收到細胞后，首先觀察并拍照記錄細胞瓶是否完好,，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象，干冰運輸的細胞檢查干冰是否揮發(fā),，細胞是否解凍,，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2.靜置完成后,，取出細胞培養(yǎng)瓶,，鏡檢、拍照(當天以及第 2,3 天請拍照),，記錄細胞狀態(tài) (所拍照片將作為后續(xù)服務依據);建議細胞傳代培養(yǎng)后,，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài),。

3.由于運輸的原因,，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系,，告知細胞的具體情況,，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

4.仔細閱讀細胞說明書,，了解細胞相關信息,，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基,、血清比例,、所需細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致,，若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題,，責任由客戶自行承擔。

備注：客戶在細胞培養(yǎng)過程中,，有任何技術問題可以技術服務電話

三,、細胞凍存操作

凍存液配方無血清凍存液，液氮儲存

細胞密度待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存,。下面 T25 瓶為例

凍存方法a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中,，1000 rpm條件下離心4 min,，棄去上清液，用PBS清洗一遍,，棄盡PBS,，加 1 mL血清重懸細胞，進行細胞計數,。

b,、根據細胞數量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5x106~1x107/mL,，輕輕混勻,，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識,。

c,、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。

注意事項凍存細胞轉入液氮后及時復蘇一管檢查細胞凍存活性，若有異常,，及時調整實驗方案

四,、售后服務

重發(fā)標準1.細胞運輸途中遭遇的各種問題，細胞丟失,、瓶身破損,、培養(yǎng)液嚴重漏液等，重發(fā);

2.收到細胞未開封,，如出現(xiàn)污染狀況,，重發(fā);

3.收到細胞3天內，發(fā)現(xiàn)污染問題,，經核實后,，重發(fā);

4.常溫發(fā)貨的細胞靜置 2 小時后,，干冰凍存發(fā)貨的細胞復蘇 2 天后,，絕大多數細胞未存活，經核實后,，重發(fā);

5.常溫發(fā)貨的細胞靜置 22 小時并且未開封或干冰凍存發(fā)貨的細胞復蘇 2 天后,，出現(xiàn)污染，經核實后,，重發(fā);

6.細胞活性問題,，請在收到產品 3 天內給我們提出真實的實驗結果，用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,，經核實后,，重發(fā);

7.視具體情況而定,。

不予重發(fā)1.客戶操作造成細胞污染，不重發(fā);

2.客戶嚴重操作失誤致細胞狀態(tài)不好,，不重發(fā);

3.非我們推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好,，不重發(fā);

4.細胞狀態(tài)不好，未提供真實清晰的培養(yǎng)前 3 天的細胞狀態(tài)照片,，不重發(fā);

5.細胞培養(yǎng)時經其它處理導致細胞出現(xiàn)問題的,，不重發(fā);

6.收到細胞發(fā)現(xiàn)問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的，不重發(fā);

7.視具體情況而定,。