NK92人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細胞產品基本信息：
細胞名稱：NK92人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細胞
種屬來源：人
組織來源：淋巴
細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣
生長特性：懸浮生長
培養(yǎng)基: NK92專用*培養(yǎng)基(已添加IL2)
生長條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳;溫度：37℃
傳代方法：1:2至1:3,，每周 3次
凍存條件：10%DMSO+50?S+40%*培養(yǎng)基,，液氮儲存
支原體檢測：無
注：該細胞復蘇后需一周左右時間方可恢復狀態(tài)，凍存時密度盡量大些,。
細胞培養(yǎng)操作：
復蘇：37℃水浴融化后,，750 rpm離心5 min，棄凍存液，加入培養(yǎng)基重懸,，在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),，起始密度為每毫升2-3×105個細胞
傳代：搖晃培養(yǎng)瓶，使細胞粗略混勻,，取細胞計數,，按每毫升2-3×105個活細胞的細胞密度進行全換液或半換液。每48 h傳一次,。
凍存：凍存液：10%DMSO+50?S+40%*培養(yǎng)基,，細胞計數后，取1×106~1×107個細胞,，800 rpm離心5 min,，棄原培養(yǎng)基，加入1 mL凍存液,，輕輕混勻,，標注封口后，放入凍存盒,，置于-80℃ 24 h,，隔天再置于液氮氣象。
注意事項：
1. IL-2分裝使用,，避免反復凍融;
2. 先配置基礎培養(yǎng)基,，用的時候再將IL-2加入培養(yǎng)基中;
3. 傳細胞時，細胞不能在培養(yǎng)箱外放太久,，小于1 h;
4. 重懸NK-92細胞要輕柔,，不要太劇烈;
5. 不要加抗菌素，若一定要加,，就加1%的青;
6. 全換液比半換液好些,，每48 h傳代一次;
7. 培養(yǎng)該細胞一定要IL-2 500-1000 U/ml，IL-2濃度無需再增高,，過高會影響細胞生長,，也不能再降低，過低細胞會死亡;
8. 培養(yǎng)過程中有少量細胞分泌物屬于正?，F(xiàn)象,，不影響細胞生長。
培養(yǎng)注意事項：
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象，干冰運輸的細胞檢查干冰是否*揮發(fā),，細胞是否解凍，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細閱讀細胞說明書,，了解細胞相關信息,，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基,、血清比例,、所需細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致,，若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題,，責任由客戶自行承擔。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài),。因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,，是正?，F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后,，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置2-4h,。
4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞,，900 rpm-1000 rpm離心3 min,，棄上清。加5 mL PBS重懸細胞,，再900 rpm-1000 rpm離心3 min,，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細胞,，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng),。
6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術部溝通交流,。由于運輸的原因,，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系,，告知細胞的具體情況,，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細胞僅供科研使用,。
8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞,。 收到細胞后次傳代建議1：2傳代 。
9. 注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿,。不是1個T25瓶傳2個10cm皿,。
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