目錄:廈門逸漠生物科技有限公司>>細胞系>>人源細胞系>> KNS-89人腦膠質瘤細胞（STR鑒定正確）
| 供貨周期 | 現貨 | 規(guī)格 | 1×106cells/T25或1mL凍存管 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | IM-H329 |
KNS-89人腦膠質瘤細胞（STR鑒定正確）
產品基本信息
細胞名稱：KNS-89人腦膠質瘤細胞（STR鑒定正確）
種屬來源：人
組織來源：腦
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
生長特性：貼壁生長
培養(yǎng)基:： 90%DMEM+10%FBS+PS
生長條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳;溫度：37℃
傳代方法：1:2至1:3,，每周 3次
凍存條件：無血清凍存液，液氮儲存
支原體檢測：無
細胞培養(yǎng)操作
1)復蘇細胞：將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000 rpm條件下離心3 min,，棄去上清液,，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入10 cm皿中,，加入約8 mL培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度,。
2)細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng)。
棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,，使消化液浸潤所有細胞,，棄去消化液，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-3 min,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
按6-8 mL/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心4 min,，棄去上清液,，補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。
將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。
3)細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存,。下面 T25 瓶為例;
a,、收集細胞及細胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中,，1000 rpm條件下離心4 min,，棄去上清液，用PBS清洗一遍,，棄盡PBS,，進行細胞計數。
b,、根據細胞數量加入無血清細胞凍存液,，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻,，每支凍存管凍存1mL細胞懸液,，注意凍存管做好標識。
c,、將凍存管放入-80℃冰箱,，24 h后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。
培養(yǎng)注意事項
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現象,，若有上述現象發(fā)生請及時和我們聯系,。
2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息,，如細胞形態(tài),、所用培養(yǎng)基、血清比例,、所需細胞因子等,，確保細胞培養(yǎng)條件一致,，若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現問題，責任由客戶自行承擔,。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰撞亡破碎形成碎片,，是正常現象,。.觀察好細胞狀態(tài)后,，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置2-4h。
4. 貼壁細胞可以消化,，懸浮細胞直接混勻收集細胞,，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清,。加5 mL PBS重懸細胞,，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，,，用新鮮的完培養(yǎng)基重懸細胞,，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng),。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng),。
6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài),，便于和我司技術部溝通交流,。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩(wěn)定的情況,，請及時和我們聯系,，告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決,。
7. 該細胞僅供科研使用。
8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞,。 收到細胞后第一次傳代建議1：2傳代 (1個T25傳2個，或者傳一個10cm皿),。
4
化工儀器網