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NALM-6人B淋巴白血病細(xì)胞（STR鑒定正確）產(chǎn)品基本信息

細(xì)胞名稱：NALM-6人B淋巴白血病細(xì)胞

規(guī)格：1x106cells/T25或1mL凍存管

細(xì)胞貨期：現(xiàn)貨,，1周左右

種屬來源：人

組織來源：外周血

細(xì)胞形態(tài)：淋巴細(xì)胞樣

生長特性：懸浮生長

培養(yǎng)基:：89%RPMI-1640+10% FBS+1%PS

生長條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳;溫度：37℃

傳代方法：1:2至1:3,，每周 2-3次

凍存條件：無血清凍存液，液氮儲存

支原體檢測：無

注意事項：限于科學(xué)研究等非醫(yī)療目的,，不可用于人類或者動物的臨床診斷使用

NALM-6人B淋巴白血病細(xì)胞（STR鑒定正確）細(xì)胞培養(yǎng)操作

1)復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,，棄去上清液,，加1-2 mL培養(yǎng)基后輕輕吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6 cm皿中,，加入約4 mL培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。

2)細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM條件下離心3-5min分鐘,，棄去上清液，補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:4的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細(xì)胞懸起,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3)細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為例;

a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,，裝入無菌離心管中,，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍,，棄盡PBS,，然后進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。

b,、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量對應(yīng)加入無血清細(xì)胞凍存液,，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻,，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,，注意凍存管做好標(biāo)識,。

c,、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。

培養(yǎng)注意事項

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,，了解細(xì)胞相關(guān)信息,，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基,、血清比例,、所需細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運輸問題，部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰撞,，死亡破碎形成碎片,，是正常現(xiàn)象,。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細(xì)胞可以消化,，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞,，再900 rpm-1000 rpm離心3 min,，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng),。

6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流,。由于運輸?shù)脑?，個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系,，告知細(xì)胞的具體情況,，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細(xì)胞僅供科研使用,。

8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,，請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后一次傳代建議1：2傳代 ,。

9.注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿,。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。

懸浮細(xì)胞收貨注意事項：

1,、收貨時需鏡下拍照(看密度,、狀態(tài))

2、靜置后需鏡下拍照(看整體密度)

a.如密度50%以下,，建議換液并豎瓶培養(yǎng)

b.如密度50%-80%,，建議換液培養(yǎng)，隔天觀察密度

c.如密度90%,，建議傳代

3,、換液及傳代處理前，培養(yǎng)瓶豎著放置至少半小時(使細(xì)胞沉到瓶底);收集上清,，必須將瓶內(nèi)所有培養(yǎng)基(70ml)全部收集!并用PBS(10ml)潤洗瓶底并收集!離心轉(zhuǎn)速為1000rpm,，5min。