NovoCyte Penteon 5激光流式細(xì)胞儀以其成功的前款產(chǎn)品 NovoCyte 為基礎(chǔ)，提供了擴(kuò)展的功能組合,，可適應(yīng)當(dāng)今日益復(fù)雜的多色流式細(xì)胞分析,。NovoCyte Penteon 5激光流式細(xì)胞儀利用多達(dá) 5 個(gè)激光器和最多 30 個(gè)獨(dú)立檢測(cè)器，現(xiàn)在您可以從多達(dá) 30 個(gè)熒光通道中靈活選擇,。NovoSampler Q 可集成到不同的實(shí)驗(yàn)室自動(dòng)化平臺(tái)中,，并高效處理 FACS 管（使用 40 位管架）以及 24、48,、96 和 384 孔板,。直觀且業(yè)內(nèi)出眾的 NovoExpress 軟件得到進(jìn)一步改進(jìn)，能夠在數(shù)據(jù)采集,、分析和報(bào)告方面提供出色的用戶體驗(yàn),。

特性

1、擴(kuò)展靈活性,，支持多達(dá) 5 個(gè)激光器和 30 個(gè)熒光通道高靈敏度和高分辨率

2,、直觀且強(qiáng)大的軟件，用于數(shù)據(jù)采集,、分析和結(jié)果報(bào)告

3,、智能設(shè)計(jì)功能和無(wú)人值守操作，可簡(jiǎn)化您的工作流程

4,、自動(dòng)化功能,，可滿足高通量檢測(cè)需求

5、動(dòng)態(tài)范圍寬達(dá) 7 個(gè)數(shù)量級(jí),，無(wú)需調(diào)節(jié)檢測(cè)器電壓

性能指標(biāo)

工作原理

高靈敏度的光電檢測(cè)器

硅光電倍增管 (SiPM) 是基于硅基底的固態(tài)半導(dǎo)體器件,，具備光子能級(jí)靈敏度，動(dòng)態(tài)范圍為 7.2 個(gè)數(shù)量級(jí),，是一款具有光子計(jì)數(shù)功能的緊湊檢測(cè)器,。NovoCyte Penteon 設(shè)計(jì)中的創(chuàng)新光學(xué)器件包含 30 個(gè)獨(dú)立的 SiPM，可收集并處理來(lái)自每個(gè)熒光通道的信號(hào),。

出色的散射光分辨率,，可檢測(cè)小顆粒

NovoCyte Penteon 散射光檢測(cè)光學(xué)系統(tǒng)和信號(hào)處理電子器件經(jīng)過(guò)優(yōu)化,，可以分辨粒徑小至 0.1 µm 的顆粒。憑借這種優(yōu)異的分辨率,，可輕松識(shí)別和分析血小板,、細(xì)菌和各種亞微米顆粒。

高重現(xiàn)性和穩(wěn)定性

NovoCyte Penteon 和 NovoCyte Quanteon 的液路系統(tǒng)專為提供高性能而設(shè)計(jì),。NovoCyte Penteon 和 NovoCyte Quanteon 擁有其他流式細(xì)胞儀很難實(shí)現(xiàn)的液路一致性和穩(wěn)定性,。使用蠕動(dòng)泵的其他儀器通常會(huì)受到液路脈動(dòng)的影響，導(dǎo)致絕對(duì)細(xì)胞計(jì)數(shù)不一致和不準(zhǔn)確,。

應(yīng)用

凋亡分析

細(xì)胞凋亡也稱為細(xì)胞程序性死亡,，是細(xì)胞調(diào)控自身死亡的過(guò)程，通過(guò)激活特定通路使細(xì)胞發(fā)生收縮,、凝聚,，并最終通過(guò)吞噬作用被清除。這與壞死細(xì)胞死亡形成鮮明對(duì)比,，壞死細(xì)胞死亡時(shí)細(xì)胞失控死亡并裂解,，可產(chǎn)生免疫反應(yīng)異常激活等有害影響。因此,，凋亡細(xì)胞以非常有序的方式死亡,，可限制其對(duì)周圍細(xì)胞和組織的破壞。

多種方法可用于測(cè)定細(xì)胞死亡并區(qū)分其為凋亡還是壞死,。NovoCyte 流式細(xì)胞儀具有自動(dòng)補(bǔ)償設(shè)置和寬熒光檢測(cè)動(dòng)態(tài)范圍,，可輕松對(duì)檢測(cè)進(jìn)行定量，無(wú)需調(diào)整 PMT 電壓

免疫表型分析

免疫狀態(tài)與疾病狀態(tài),、治療效率以及對(duì)疫苗等外部刺激的反應(yīng)有關(guān),。免疫表型分析可快速識(shí)別候選細(xì)胞類型、亞類和功能,。由于免疫細(xì)胞可能影響疫苗的免疫原性及其效能,，因此監(jiān)測(cè)多種免疫細(xì)胞群的頻率以及特定細(xì)胞亞群（如單核細(xì)胞、NK 細(xì)胞,、T 細(xì)胞和 B 細(xì)胞）的分化或活化狀態(tài)至關(guān)重要,。NovoCyte 流式細(xì)胞儀可同時(shí)定量分析多種白細(xì)胞，以便更好地了解患者的免疫狀態(tài)并監(jiān)測(cè)機(jī)體對(duì)傳染病的免疫反應(yīng),。

細(xì)胞增殖

細(xì)胞增殖是一種重要功能,，是高度結(jié)構(gòu)化的事件，如果不受控制,，會(huì)導(dǎo)致疾病,。我們可以通過(guò)絕對(duì)細(xì)胞計(jì)數(shù)或使用染料（例如 CFSE）測(cè)量增殖,。當(dāng) CFSE 標(biāo)記的細(xì)胞發(fā)生分裂時(shí),，染料在子細(xì)胞之間平均分配,，隨著染料的不斷稀釋，我們可以測(cè)量 CFSE 熒光隨時(shí)間的損失,。此外,，還繪制染料的平均熒光強(qiáng)度 (MFI) 與細(xì)胞濃度隨時(shí)間的變化曲線，以揭示兩者之間的反比關(guān)系,。這類分析方法通常用于觀察 T 淋巴細(xì)胞活化的變化,。

圖：使用 CFSE 測(cè)量 Jurkat T 細(xì)胞增殖。A) 使用 CFSE 標(biāo)記 Jurkat T 細(xì)胞,，并通過(guò) NovoCyte 流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞隨時(shí)間的變化,，以測(cè)定細(xì)胞分裂。每個(gè)峰值都對(duì)應(yīng)于一個(gè)單獨(dú)的時(shí)間點(diǎn),。B) 使用隨細(xì)胞分裂產(chǎn)生的信號(hào)稀釋,，繪制絕對(duì)細(xì)胞計(jì)數(shù)與 CFSE 的平均熒光強(qiáng)度 (MFI) 隨時(shí)間的變化曲線。

細(xì)胞因子檢測(cè)

細(xì)胞因子是免疫細(xì)胞對(duì)病原體,、自身免疫或治療藥物的激活反應(yīng)所必需的小分子,。細(xì)胞因子的信號(hào)傳導(dǎo)可以調(diào)節(jié)基因調(diào)控、先天免疫反應(yīng)和適應(yīng)性免疫反應(yīng)以及炎癥,。因此,，測(cè)量細(xì)胞因子產(chǎn)生并確定細(xì)胞因子產(chǎn)生的來(lái)源對(duì)于深入了解免疫反應(yīng)非常重要?；谖⑶虻牧魇郊?xì)胞術(shù)檢測(cè)是測(cè)量細(xì)胞因子的高效方法,，可以使用具有不同熒光強(qiáng)度的混合微球來(lái)測(cè)量單個(gè)樣品中的多種可溶性分析物。

細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)檢測(cè)

對(duì)細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的檢測(cè)和分析有助于細(xì)胞亞群和細(xì)胞過(guò)程的額外表征,。為分析非細(xì)胞表面蛋白質(zhì),，需要進(jìn)行細(xì)胞固定和破膜。然而,，許多磷酸特異性抗體與許多基于去垢劑的常用破膜方法（用于細(xì)胞內(nèi)染色）不兼容,。在確定磷酸特異性抗體的適宜固定和破膜方法時(shí)，需要特別注意,。最常見的方法是用 1.5% 多聚甲醛固定,，然后用 100% 甲醇破膜。雖然這種方法適用于多種抗體,，但請(qǐng)注意,，并非每種磷酸特異性抗體都適用。

此外,，在異質(zhì)性樣品中鑒定不同的細(xì)胞群,，需要對(duì)表面蛋白連接的磷酸化蛋白進(jìn)行染色。必須特別考慮這些表位對(duì)固定劑的敏感性，并采取相應(yīng)預(yù)防措施,，避免損害表位,。因此，樣品在固定前可能需要對(duì)特定的表面標(biāo)記物進(jìn)行染色

細(xì)胞周期分析

正常的人體細(xì)胞是含有恒定數(shù)量 DNA 的二倍體,。在細(xì)胞分裂的過(guò)程中,，DNA 合成導(dǎo)致總 DNA 含量翻倍，隨后在有絲分裂后恢復(fù)正常的 DNA 含量,。利用 NovoCyte 流式細(xì)胞儀,，可以進(jìn)行詳細(xì)的細(xì)胞周期分析，了解腫瘤細(xì)胞分化,、細(xì)胞轉(zhuǎn)化以及細(xì)胞與化合物之間的相互作用,。

圖：在 10 µg/M MG132 或 500 µg/M 5-FU 處理 16 小時(shí)后，使用 ACEA NovoCyte 流式細(xì)胞儀分析 A549 細(xì)胞的細(xì)胞周期分布,。NovoExpress 內(nèi)置的細(xì)胞周期分析模塊中的圖像顯示了處于 G0/G1 期（綠色）,、S 期（黃色）和 G2/M 期（藍(lán)色）的細(xì)胞。與正常未處理的細(xì)胞相比,，MG132 處理的細(xì)胞停滯在 G2/M 期,，而 5-FU 處理的細(xì)胞停滯在 G0/G1 期。