高通量基因敲除技術(shù)藥物篩選和靶點鑒定檢測技術(shù)服務(wù)詳情介紹

藥物發(fā)現(xiàn)的關(guān)鍵步驟是靶點識別——即發(fā)現(xiàn)“可成藥"的生物靶點,，在確定靶點后，還必須對其進行驗證以證明靶點與疾病表型之間的功能關(guān)系，同時確保安全性,。藥物發(fā)現(xiàn)的過程漫長且昂貴,，但良好的靶點驗證將提高開發(fā)有效藥物并zuì終在臨床取得成功的可能性。CRISPR-Cas9基因編輯技術(shù)的zuì新發(fā)展對藥物發(fā)現(xiàn)產(chǎn)生了巨大影響,，研究人員能夠有意激活或抑制基因,，以闡明和了解那些在疾病進展中發(fā)揮作用的細胞途徑。它還可用于創(chuàng)建準確的模型,，以更好地研究疾病表型并篩選小分子以快速識別眾多潛在目標,。

一旦識別出這些潛在的靶點，就可以利用質(zhì)譜技術(shù)來研究潛在藥物分子與其靶標dànbáizhì或代謝產(chǎn)物之間的相互作用,，揭示藥物如何與其靶點結(jié)合,，以及這種結(jié)合如何影響細胞內(nèi)的信號傳遞和代謝途徑。通過結(jié)合高通量基因敲除技術(shù)和質(zhì)譜分析,，研究人員不僅可以快速地識別新的藥物靶點,，還能深入理解藥物的作用機制，從而設(shè)計出更有效,、更安全的治療方法,。

高通量基因敲除在藥物發(fā)現(xiàn)中的應(yīng)用

百泰派克生物科技（BTP）基于高通量基因敲除技術(shù)，結(jié)合高通量質(zhì)譜平臺,，可以為您提供從基因敲除到藥物靶點鑒定的一站式解決方案,。我們優(yōu)化的CRISPR/Cas9系統(tǒng)可實現(xiàn)人/小鼠細胞系、原代細胞,、免疫細胞及iPS細胞的單/多基因敲除,、移碼突變和大序列敲除。BTP自建7大檢測平臺,，擁有CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認證實驗室,，旨在為您提供zuì優(yōu)質(zhì)的科研服務(wù)，我們期待與您的合作,，歡迎免費聯(lián)系我們,，了解更多服務(wù)詳情！

服務(wù)優(yōu)勢

1）敲除效率保證：優(yōu)化的CRISPR/Cas9系統(tǒng),，超過80%靶點敲除效率在70%,；基因敲除后，我們采用Sanger測序和深度dànbáizhì組學技術(shù)對敲除效率進行雙驗證,，雙重保障數(shù)據(jù)的真實性,。

2）多種基于靶標的藥物靶點鑒定平臺：我們依托高分辨質(zhì)譜平臺，結(jié)合親和層析技術(shù)以及活性位點定向探針等技術(shù),，開發(fā)并驗證了多種基于靶標的藥物靶點鑒定平臺,，可滿足不同的科研需求,。

3）項目周期短：在進行基因敲除實驗前，我們會對不同細胞中基因必要性及表達量進行分析,，確保實驗的可行性,，降低實驗失敗風險；且無需針對客戶的靶點設(shè)計預實驗進行g(shù)RNA驗證,，大大縮短了項目周期,。

4）一站式服務(wù)：BTP擁有豐富的組學服務(wù)經(jīng)驗以及zhuānyè的技術(shù)人員，可以根據(jù)您的需求定制zuì優(yōu)的項目方案,，您只需將您的實驗?zāi)康母嬖V我們并寄送樣品,，BTP負責所有項目后續(xù)，包括樣品處理,、實驗分析,、數(shù)據(jù)分析和項目報告。

應(yīng)用案例

1.全基因組 CRISPR-cas9 敲除篩選結(jié)合質(zhì)譜技術(shù)確定 KRAS 突變結(jié)腸癌 MEK 抑制劑耐藥性靶點

靶向 KRAS 通路是治療結(jié)直腸癌（CRC）非常有前景的方法,，但結(jié)直腸癌細胞能夠耐受 MEK 抑制劑,，使得 MEK 抑制劑在 CRC 患者中的臨床試驗結(jié)果不盡人意。因此,，作者 在 MEK 抑制劑存在的情況下進行全基因組 CRISPR/Cas9 篩選,，以鑒定在含有 KRAS 突變的 CRC 模型中通過 MEK 抑制而綜合致死的基因。結(jié)果表明,，GRB7 通過 RTK 途徑使 CRC 細胞對 MEK 抑制劑產(chǎn)生主要耐藥性,。 GRB7 免疫沉淀物的質(zhì)譜分析表明 PLK1 是 GRB7 的主要相互作用激酶。PLK1 和 MEK 抑制劑的組合在體外和體內(nèi)協(xié)同抑制 CRC 細胞增殖并誘導細胞凋亡,。zuì終,，作者確定 GRB7-PLK1 是介導 RTK 的樞軸，導致 MEK 抑制劑耐受,。該研究表明,，在攜帶 KRAS 突變的 CRC 患者的臨床治療中，PLK1 是協(xié)同 MEK 抑制劑的一個有前景的靶點,。

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圖1. CRISPR 文庫篩選,，確定 RTK 通路參與 KRAS 突變結(jié)腸癌細胞的 MEK抑制劑耐藥性

2.利用 CRISPR 高通量篩選下一代候選藥物

jífēitìní和厄洛替尼是治療非小細胞肺癌的有效藥物，它們以表皮生長因子受體（EGFR）為治療靶點,，但是 EGFR 的獲得性突變 C797S 阻止藥物與 EGFR làoānsuān激酶結(jié)構(gòu)域靶位點相互作用,，使患者對這些藥物治療表現(xiàn)出耐藥性。阿斯利康（Astra Zeneca）使用CRISPR-Cas9高通量基因敲除技術(shù)在癌細胞系中創(chuàng)建了jīngquè的 C797S 突變,， C797S 細胞系模型的應(yīng)用使藥物篩選能夠識別針對這種新突變的下一代化合物,。

Thress, K., et al. Nat Med.

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圖2. 獲得性EGFR C797S突變介導的AZD9291獲得性耐藥性

百泰派克生物科技特色項目

一、蛋白測序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統(tǒng)對dànbáizhì序列進行分析,，提供基于質(zhì)譜的蛋白測序分析服務(wù),，包括對dànbáizhì的氨基酸組成分析，Nduāncèxù,，Cduāncèxù和全序列分析,，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務(wù)。對于未知理論序列的dànbáizhì,，提供基于從頭測序法的dànbáizhì從頭測序服務(wù),，對蛋白序列進行分析。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1.采用目前世界上先進的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實現(xiàn)對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測定蛋白N端多達 70個氨基酸序列;

4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液,、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug,，即可完成檢測;

6.測序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響,。

二,、dànbáizhì組學

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺結(jié)合Nano-LC，提供定量dànbáizhì組學,、靶向dànbáizhì組學,、多肽組學、翻譯后修飾蛋白組學等多種dànbáizhì組學分析服務(wù),。此外,，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學服務(wù)，助力微量樣本蛋白組學,、大樣本群醫(yī)學及高通量修飾組學等研究工作,。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規(guī)模實驗分析，發(fā)現(xiàn)新的生物標記物;

2.體內(nèi)體外多種dànbáizhì標記方法,，適用于分析組織,、細胞、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高,，實驗結(jié)果重復度高;

4.可檢測較低豐度蛋白,，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學分析，分析更系統(tǒng)準確,。

三,、單細胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進行單細胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析，采用金屬元素標記物（通常是金屬元素標記的特異抗體）標記細胞表面和內(nèi)部的分子,，然后用流式細胞原理分離單個細胞,，再用電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）分析單個細胞的原子質(zhì)量譜，zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細胞表面和內(nèi)部的信號分子表達量,。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1.技術(shù)先進,，填補技術(shù)空白

采用金屬標記抗體技術(shù)，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問題,?？稍趩渭毎麑用嫔蠈Χ喾N指標同時進行表征,，百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標蛋白。

2.分析數(shù)量大,，成本較低

單細胞RNAseq受成本等因素限制,，所有樣本細胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個左右，而流式質(zhì)譜技術(shù)一次（單樣本）就可分析至少10^5的細胞,，實現(xiàn)了數(shù)量級的提高,，且成本不高于單細胞RNAseq。

3.應(yīng)用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細胞亞群的變化,，在臨床診斷,、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會有新應(yīng)用方向,。除常規(guī)蛋白外,，質(zhì)譜流式細胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測細胞存活率,、細胞大小,、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等,。

四,、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案,。我們能夠幫助您實現(xiàn)10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別,。通過我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學分析平臺進行免疫肽組學分析，可從zuì小的樣品材料中進行可重復的識別和定量,。該服務(wù)可以應(yīng)用于大規(guī)模的研究,，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案,，深入挖掘未知的靶標,。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù),，MALDI TOF,，高效色譜分離技術(shù)，提供一系列完善的生物藥物分析方案,，從dànbáizhì,、多肽、抗體,、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結(jié)構(gòu)分析,，到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務(wù)，幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì),。

百泰派克生物科技七大檢測平臺

百泰派克生物科技-生物制品表征,，生物質(zhì)譜多組學優(yōu)質(zhì)服務(wù)商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務(wù)。公司實驗室遵循NMPA,、ICH,、FDA和EMA等的法規(guī)和指導原則，通過CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認證,，建立了完備的質(zhì)量體系，數(shù)據(jù)冷熱/異地備份,，設(shè)備定期計量/期間核查,，軟件審計追蹤，為客戶提供一體化解決方案和技術(shù)服務(wù),，支持新藥研發(fā),、藥物申報注冊和生產(chǎn)放行。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系,，zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測分析服務(wù),；

2.獲國家CNAS實驗室認可，為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務(wù),；

3.業(yè)務(wù)范圍覆蓋dànbáizhì組學,、多肽組學、代謝組學,、生物藥物表征,、單細胞分析、單細胞質(zhì)譜流式,、生信云分析以及多組學生物質(zhì)譜整合分析等,；

4.七大質(zhì)量控制檢測平臺，滿足您一站式服務(wù)需求,；

5.服務(wù)3000+企業(yè),，10000+客戶的選擇；

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務(wù)!

高通量基因敲除技術(shù)藥物篩選和靶點鑒定檢測技術(shù)服務(wù)詳情介紹