Edman降解是什么,？蛋白質(zhì)測序的核心技術(shù)解析檢測技術(shù)服務(wù)詳情介紹

dànbáizhì是生命活動的執(zhí)行者,，其一級結(jié)構(gòu)（氨基酸序列）決定了其功能。要研究dànbáizhì的結(jié)構(gòu)與功能,，首先必須了解其氨基酸組成和排列順序,。因此，dànbáizhì測序成為現(xiàn)代生命科學(xué)研究和生物醫(yī)藥開發(fā)中的關(guān)鍵步驟,。而在眾多測序方法中,，Edman降解（Edman degradation）被譽(yù)為dànbáizhì一級結(jié)構(gòu)解析的“經(jīng)典之選"。

一,、什么是Edman降解,？

Edman降解是一種用于確定dànbáizhìN端氨基酸序列的化學(xué)方法，由澳大利亞化學(xué)家Pehr Edman于1950年開發(fā),。其核心原理是：通過苯異硫氰酸酯（PITC）選擇性標(biāo)記肽鏈的N端氨基酸,，在溫和條件下裂解形成可識別的PTH-氨基酸衍生物，同時保留剩余肽鏈用于下一輪循環(huán),。這種逐步“剝離"氨基酸的方式,，可以順序解析出dànbáizhìN端的氨基酸組成。

二,、Edman降解的反應(yīng)流程：

1,、標(biāo)記：PITC與肽鏈N端游離氨基反應(yīng)，形成環(huán)狀酰胺中間體,。

2,、裂解：在酸性條件下切斷N端dìyī個氨基酸，與PITC形成穩(wěn)定的PTH-氨基酸,。

3,、鑒定：使用高效液相色譜（HPLC）或其他方法檢測PTH-氨基酸種類。

4,、重復(fù)循環(huán)：重復(fù)以上步驟,，逐個剝離氨基酸，直到達(dá)到測序上限（一般為30個殘基以內(nèi)）,。

三,、Edman降解的優(yōu)勢與局限

? 優(yōu)勢：

• 高保真度：逐個氨基酸識別，序列準(zhǔn)確性高,。

• 無需標(biāo)簽：不需要對目標(biāo)蛋白進(jìn)行同位素或熒光標(biāo)記,。

• 對已純化蛋白有效：適用于單一dànbáizhì樣本的序列驗證。

? 局限性：

• N端封閉限制：若蛋白N端被修飾（如乙?；?、甲酰化）,，將無法進(jìn)行Edman反應(yīng),。

• 不適合復(fù)雜混合物：只能對單一,、多肽純度較高的樣本有效。

• 序列長度有限：一般測序上限為20–30個氨基酸殘基,，無法覆蓋全長蛋白,。

• 對蛋白量有要求：通常需要≥1 pmol級別的純蛋白輸入量。

四,、Edman降解在科研中的應(yīng)用

盡管現(xiàn)代質(zhì)譜（MS）技術(shù)逐漸成為主流,，Edman降解依然在以下領(lǐng)域具有dútè價值：

1、dànbáizhìN端驗證

在重組蛋白表達(dá)與純化后,，研究人員常使用Edman降解確認(rèn)目標(biāo)蛋白是否有N端截斷,、修飾，或起始密碼子翻譯是否正確,。

2,、抗體表位測序

Edman法適用于對單一多肽（如抗原肽、B細(xì)胞表位）進(jìn)行序列確認(rèn),，特別是在開發(fā)多克隆或單克隆抗體時,。

3、結(jié)合質(zhì)譜進(jìn)行雙重驗證

在某些關(guān)鍵項目中,，如臨床級蛋白藥物開發(fā),、蛋白工程研究，研究者會同時使用Edman降解和LC-MS/MS對序列進(jìn)行交叉確認(rèn),，確保結(jié)果無誤,。

五、Edman降解 vs 質(zhì)譜測序：互為補(bǔ)充

? 實踐經(jīng)驗顯示，在Nduāncèxù,、藥物質(zhì)量控制,、定量標(biāo)準(zhǔn)品開發(fā)等領(lǐng)域，兩者聯(lián)用效果zuì佳,。

Edman降解作為dànbáizhì測序的奠基性技術(shù),，其高精度與可解釋性在某些應(yīng)用中依然wúkětìdài。百泰派克生物科技堅持以科研需求為導(dǎo)向,，致力于為高校課題組,、科研機(jī)構(gòu)及生物醫(yī)藥研發(fā)團(tuán)隊提供高標(biāo)準(zhǔn)、可信賴的蛋白測序解決方案與技術(shù)支持,。

百泰派克生物科技特色項目

一,、蛋白測序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統(tǒng)對dànbáizhì序列進(jìn)行分析，提供基于質(zhì)譜的蛋白測序分析服務(wù),，包括對dànbáizhì的氨基酸組成分析,，Nduāncèxù,，Cduāncèxù和全序列分析，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務(wù),。對于未知理論序列的dànbáizhì,，提供基于從頭測序法的dànbáizhì從頭測序服務(wù)，對蛋白序列進(jìn)行分析,。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1.采用目前世界上優(yōu)良的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實現(xiàn)對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測定蛋白N端多達(dá) 70個氨基酸序列;

4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液,、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測;

6.測序不受N端封閉,，PEC和和糖基化等N端修飾的影響,。

二、dànbáizhì組學(xué)

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺結(jié)合Nano-LC,，提供定量dànbáizhì組學(xué),、靶向dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué),、翻譯后修飾蛋白組學(xué)等多種dànbáizhì組學(xué)分析服務(wù),。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學(xué)服務(wù),，助力微量樣本蛋白組學(xué),、大樣本群醫(yī)學(xué)及高通量修飾組學(xué)等研究工作。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規(guī)模實驗分析,，發(fā)現(xiàn)新的生物標(biāo)記物;

2.體內(nèi)體外多種dànbáizhì標(biāo)記方法,，適用于分析組織、細(xì)胞,、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高,，實驗結(jié)果重復(fù)度高;

4.可檢測較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學(xué)分析,，分析更系統(tǒng)準(zhǔn)確,。

三、單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進(jìn)行單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析,，采用金屬元素標(biāo)記物（通常是金屬元素標(biāo)記的特異抗體）標(biāo)記細(xì)胞表面和內(nèi)部的分子,，然后用流式細(xì)胞原理分離單個細(xì)胞，再用電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）分析單個細(xì)胞的原子質(zhì)量譜,，zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細(xì)胞表面和內(nèi)部的信號分子表達(dá)量,。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1.技術(shù)優(yōu)良，*技術(shù)空白

采用金屬標(biāo)記抗體技術(shù),，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問題,。可在單細(xì)胞層面上對多種指標(biāo)同時進(jìn)行表征,，百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標(biāo)蛋白,。

2.分析數(shù)量大,，成本較低

單細(xì)胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細(xì)胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個左右,，而流式質(zhì)譜技術(shù)一次（單樣本）就可分析至少10^5的細(xì)胞,，實現(xiàn)了數(shù)量級的提高，且成本不高于單細(xì)胞RNAseq,。

3.應(yīng)用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細(xì)胞亞群的變化,，在臨床診斷、疾病機(jī)制研究等方面具有極大的研究前景,；

②將金屬標(biāo)簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會有新應(yīng)用方向,。除常規(guī)蛋白外，質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾,；

③可檢測細(xì)胞存活率,、細(xì)胞大小、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達(dá)量,、DNA合成速率以及蛋白酶活性等,。

四、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的,、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案,。我們能夠幫助您實現(xiàn)10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學(xué)分析平臺進(jìn)行免疫肽組學(xué)分析,，可從zuì小的樣品材料中進(jìn)行可重復(fù)的識別和定量,。該服務(wù)可以應(yīng)用于大規(guī)模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥,、免疫疾病及傳染病的解決方案,，深入挖掘未知的靶標(biāo)。

五,、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù),，MALDI TOF，高效色譜分離技術(shù),，提供一系列完善的生物藥物分析方案,，從dànbáizhì,、多肽,、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結(jié)構(gòu)分析,，到產(chǎn)品變異性和純度分析,。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務(wù)，幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì),。

百泰派克生物科技七大檢測平臺

百泰派克生物科技-生物制品表征,，生物質(zhì)譜多組學(xué)優(yōu)質(zhì)服務(wù)商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務(wù)。公司實驗室遵循NMPA,、ICH,、FDA和EMA等的法規(guī)和指導(dǎo)原則，通過CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認(rèn)證,，建立了完備的質(zhì)量體系,，數(shù)據(jù)冷熱/異地備份，設(shè)備定期計量/期間核查,，軟件審計追蹤,，為客戶提供一體化解決方案和技術(shù)服務(wù)，支持新藥研發(fā),、藥物申報注冊和生產(chǎn)放行,。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系，zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測分析服務(wù),；

2.獲國家CNAS實驗室認(rèn)可,，為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務(wù)；

3.業(yè)務(wù)范圍覆蓋dànbáizhì組學(xué),、多肽組學(xué),、代謝組學(xué)、生物藥物表征,、單細(xì)胞分析,、單細(xì)胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學(xué)生物質(zhì)譜整合分析等,；

4.七大質(zhì)量控制檢測平臺,，滿足您一站式服務(wù)需求；

5.服務(wù)3000+企業(yè),，10000+客戶的選擇,；

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務(wù)!

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