蛋白質(zhì)分子量測定：關(guān)鍵技術(shù),、未來前景檢測技術(shù)服務(wù)詳情介紹

dànbáizhì分子量測定廣泛應(yīng)用于dànbáizhì結(jié)構(gòu)解析,、功能研究、藥物開發(fā),、疾病診斷等領(lǐng)域,。準(zhǔn)確的分子量測定不僅有助于理解dànbáizhì的結(jié)構(gòu)和功能，還能用于鑒定dànbáizhì的修飾狀態(tài),、聚集行為和復(fù)合物組成,。目前，已開發(fā)出多種測定dànbáizhì分子量的方法，包括凝膠電泳,、質(zhì)譜分析,、超速離心、凝膠過濾色譜,、光散射技術(shù)和核磁共振等,。不同方法各有優(yōu)劣，適用于不同類型的dànbáizhì及實驗需求,。百泰派克生物科技在本文為您系統(tǒng)地介紹這些技術(shù)的概述,，探討其局限性，并展望未來發(fā)展趨勢,。

一,、dànbáizhì分子量測定的關(guān)鍵技術(shù)

1、SDS-PAGE（十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳）

（1）原理

SDS-PAGE 是基于dànbáizhì在SDS（十二烷基硫酸鈉）變性作用下的電泳遷移率差異進(jìn)行分子量測定的方法,。SDS使dànbáizhì帶上均一的負(fù)電荷,，使分子量成為影響遷移速率的主要因素。

（2）優(yōu)點

* 簡便快捷,，實驗設(shè)備要求低,。

• 廣泛適用，適用于大多數(shù)dànbáizhì的分子量估算,。

• 可同時分析多個樣品,，成本較低。

（3）局限性

* 精度較低,，只能提供分子量的相對估計,。

• 不能區(qū)分具有相同分子量但不同構(gòu)象的蛋白。

• 對糖蛋白等特殊dànbáizhì可能產(chǎn)生誤導(dǎo)性結(jié)果,。

2,、質(zhì)譜分析（Mass Spectrometry, MS）

（1）原理

質(zhì)譜技術(shù)利用離子化的方法將dànbáizhì分子解離成帶電粒子，并通過質(zhì)荷比（m/z） 進(jìn)行分離和檢測,，以測定dànbáizhì的分子量,。常見的離子化方法包括基質(zhì)輔助激光解吸/電離（MALDI） 和電噴霧離子化（ESI）。

（2）優(yōu)點

* 高精度,，可達(dá)到±0.01% 以內(nèi)的誤差,。

• 適用于dànbáizhì修飾研究，如磷酸化,、乙?；确g后修飾。

• 檢測靈敏度高,，適用于低濃度樣品,。

（3）局限性

* 樣品需要純化,，雜質(zhì)可能干擾檢測。

• 大型復(fù)合蛋白難以直接分析,，需要額外的解離策略,。

• 需要昂貴儀器，實驗成本高,。

3,、超速離心分析（Analytical Ultracentrifugation, AUC）

（1）原理

AUC 通過高速旋轉(zhuǎn)產(chǎn)生的離心力測量dànbáizhì在溶液中的沉降行為，從而推算分子量,。主要有沉降速率法（SV） 和沉降平衡法（SE） 兩種模式,。

（2）優(yōu)點

* 可測量天然狀態(tài)下的dànbáizhì分子量，不依賴標(biāo)準(zhǔn)曲線,。

• 可用于研究dànbáizhì聚集狀態(tài) 和 寡聚化程度,。

• 可用于測定蛋白復(fù)合體的真實分子量。

（3）局限性

* 實驗時間較長,，通常需12-48小時,。

• 數(shù)據(jù)分析復(fù)雜，需要zhuānyè軟件（如 SEDFIT）,。

• 儀器昂貴,，操作需要zhuānyè培訓(xùn)。

4,、凝膠過濾色譜（Size Exclusion Chromatography, SEC）

（1）原理

SEC 基于dànbáizhì分子在凝膠顆粒間的不同擴(kuò)散行為進(jìn)行分離,，大分子較快通過柱子，小分子則滯留時間較長,。dànbáizhì的洗脫體積與其分子量相關(guān),。

（2）優(yōu)點

* 非變性方法，可測定dànbáizhì的天然構(gòu)象和聚集狀態(tài),。

• 可與HPLC或MS聯(lián)用,，增強(qiáng)檢測能力。

• 樣品回收率高,，適用于dànbáizhì純化,。

（3）局限性

* 需要校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品，誤差較大,。

• 對非球形蛋白精度較低,，如纖維狀蛋白。

• 樣品濃度要求較高,，低濃度蛋白難以檢測,。

5、光散射技術(shù)（Multi-Angle Light Scattering, MALS）

（1）原理

MALS 通過測量dànbáizhì分子散射的光強(qiáng)度與角度關(guān)系來計算其分子量,，常與SEC聯(lián)用（SEC-MALS）。

（2）優(yōu)點

* 無需標(biāo)準(zhǔn)品，直接測定分子量,。

• 適用于非球形蛋白,，不受形狀影響。

• 可分析dànbáizhì的聚集狀態(tài),。

（3）局限性

* 對樣品濃度敏感,，低濃度蛋白信號較弱。

• 數(shù)據(jù)處理復(fù)雜,，需要zhuānyè軟件,。

二、dànbáizhì分子量測定未來發(fā)展趨勢

1,、結(jié)合多種技術(shù)以提高準(zhǔn)確性

未來的dànbáizhì分子量測定可能更多地依賴多種技術(shù)的結(jié)合,，例如SEC-MALS-MS（將凝膠過濾、光散射和質(zhì)譜結(jié)合）可實現(xiàn)更jīngzhǔn的分子量測定,。

2,、發(fā)展新型高通量測定方法

隨著生物醫(yī)藥研究的發(fā)展，高通量蛋白分析技術(shù)（如微流控芯片,、單分子技術(shù)）將成為趨勢,，提高測定效率和數(shù)據(jù)可靠性。

3,、AI與機(jī)器學(xué)習(xí)輔助數(shù)據(jù)分析

人工智能和機(jī)器學(xué)習(xí)可用于優(yōu)化dànbáizhì分子量數(shù)據(jù)分析,，提高模型擬合精度，降低實驗誤差,。

4,、開發(fā)更高靈敏度的新型檢測技術(shù)

如超高分辨率質(zhì)譜（HRMS）和低濃度蛋白分析技術(shù)的發(fā)展，使得更復(fù)雜的dànbáizhì樣本也能得到準(zhǔn)確的分子量測定,。

dànbáizhì分子量測定的各種技術(shù)在精度,、適用性和局限性方面有所不同。未來的發(fā)展方向?qū)⒅赜谔岣呔?、自動化檢測,、高通量分析及數(shù)據(jù)智能化。在dànbáizhì分子量測定領(lǐng)域,，百泰派克生物科技致力于提供前沿的技術(shù)支持和服務(wù),。我們憑借優(yōu)良的實驗設(shè)施和zhuānyè的研究團(tuán)隊，為客戶提供jīngzhǔn,、高效的dànbáizhì分析解決方案,。期待與您的合作。

百泰派克生物科技特色項目

一,、蛋白測序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統(tǒng)對dànbáizhì序列進(jìn)行分析,，提供基于質(zhì)譜的蛋白測序分析服務(wù),，包括對dànbáizhì的氨基酸組成分析，Nduāncèxù,，Cduāncèxù和全序列分析,，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務(wù)。對于未知理論序列的dànbáizhì,，提供基于從頭測序法的dànbáizhì從頭測序服務(wù),，對蛋白序列進(jìn)行分析。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1.采用目前世界上優(yōu)良的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實現(xiàn)對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測定蛋白N端多達(dá) 70個氨基酸序列;

4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液,、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug,，即可完成檢測;

6.測序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響,。

二,、dànbáizhì組學(xué)

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺結(jié)合Nano-LC，提供定量dànbáizhì組學(xué),、靶向dànbáizhì組學(xué),、多肽組學(xué)、翻譯后修飾蛋白組學(xué)等多種dànbáizhì組學(xué)分析服務(wù),。此外,，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學(xué)服務(wù)，助力微量樣本蛋白組學(xué),、大樣本群醫(yī)學(xué)及高通量修飾組學(xué)等研究工作,。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規(guī)模實驗分析，發(fā)現(xiàn)新的生物標(biāo)記物;

2.體內(nèi)體外多種dànbáizhì標(biāo)記方法,，適用于分析組織,、細(xì)胞、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高,，實驗結(jié)果重復(fù)度高;

4.可檢測較低豐度蛋白,，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學(xué)分析，分析更系統(tǒng)準(zhǔn)確,。

三,、單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進(jìn)行單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析，采用金屬元素標(biāo)記物（通常是金屬元素標(biāo)記的特異抗體）標(biāo)記細(xì)胞表面和內(nèi)部的分子,，然后用流式細(xì)胞原理分離單個細(xì)胞,，再用電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）分析單個細(xì)胞的原子質(zhì)量譜，zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細(xì)胞表面和內(nèi)部的信號分子表達(dá)量,。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1.技術(shù)優(yōu)良,，*技術(shù)空白

采用金屬標(biāo)記抗體技術(shù)，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問題,?？稍趩渭?xì)胞層面上對多種指標(biāo)同時進(jìn)行表征,，百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標(biāo)蛋白。

2.分析數(shù)量大,，成本較低

單細(xì)胞RNAseq受成本等因素限制,，所有樣本細(xì)胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個左右,，而流式質(zhì)譜技術(shù)一次（單樣本）就可分析至少10^5的細(xì)胞,，實現(xiàn)了數(shù)量級的提高，且成本不高于單細(xì)胞RNAseq,。

3.應(yīng)用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細(xì)胞亞群的變化,，在臨床診斷、疾病機(jī)制研究等方面具有極大的研究前景,；

②將金屬標(biāo)簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會有新應(yīng)用方向,。除常規(guī)蛋白外，質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾,；

③可檢測細(xì)胞存活率,、細(xì)胞大小、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達(dá)量,、DNA合成速率以及蛋白酶活性等,。

四、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的,、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案,。我們能夠幫助您實現(xiàn)10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學(xué)分析平臺進(jìn)行免疫肽組學(xué)分析,，可從zuì小的樣品材料中進(jìn)行可重復(fù)的識別和定量,。該服務(wù)可以應(yīng)用于大規(guī)模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥,、免疫疾病及傳染病的解決方案,，深入挖掘未知的靶標(biāo)。

五,、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù),，MALDI TOF，高效色譜分離技術(shù),，提供一系列完善的生物藥物分析方案,，從dànbáizhì、多肽,、抗體,、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結(jié)構(gòu)分析，到產(chǎn)品變異性和純度分析,。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務(wù),，幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì),。

百泰派克生物科技七大檢測平臺

百泰派克生物科技-生物制品表征,，生物質(zhì)譜多組學(xué)優(yōu)質(zhì)服務(wù)商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務(wù),。公司實驗室遵循NMPA、ICH,、FDA和EMA等的法規(guī)和指導(dǎo)原則,，通過CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認(rèn)證，建立了完備的質(zhì)量體系,，數(shù)據(jù)冷熱/異地備份,，設(shè)備定期計量/期間核查，軟件審計追蹤,，為客戶提供一體化解決方案和技術(shù)服務(wù),，支持新藥研發(fā)、藥物申報注冊和生產(chǎn)放行,。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系,，zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測分析服務(wù)；

2.獲國家CNAS實驗室認(rèn)可,，為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務(wù),；

3.業(yè)務(wù)范圍覆蓋dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué),、代謝組學(xué),、生物藥物表征、單細(xì)胞分析,、單細(xì)胞質(zhì)譜流式,、生信云分析以及多組學(xué)生物質(zhì)譜整合分析等；

4.七大質(zhì)量控制檢測平臺,，滿足您一站式服務(wù)需求,；

5.服務(wù)3000+企業(yè)，10000+客戶的選擇,；

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務(wù)!

蛋白質(zhì)分子量測定：關(guān)鍵技術(shù),、未來前景檢測技術(shù)服務(wù)詳情介紹