實(shí)驗(yàn)材料與試劑配制：

1.  儀器與材料：酶標(biāo)儀（使用前預(yù)熱30分鐘），微量加液器,、吸頭,、蒸餾水或去離子水,，濾紙。

2. 20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋,，即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水,。

樣品收集、處理及保存：豚鼠(TIMP-1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 ELISA

【細(xì)胞培養(yǎng)上清】：適用于檢測(cè)體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份,。用無(wú)菌管收集細(xì)胞上清液,，以1000×g離心15分鐘，收集上清,。

【血清】：在室溫下,，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘,，取上清待測(cè),。

【血漿】：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20 分鐘后,，以1000×g離心15分鐘,，收集上清。

 【體液】：包括胸腹水,、腦脊液,，分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,，以1000×g離心15分鐘,，收集上清。

 【樣本要求】：樣品中不能含有NaN3,，因NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性,。

 【樣本保存】：如果樣品不能立即檢測(cè)，應(yīng)將其分裝,，-80 ℃保存,，避免反復(fù)冷凍。保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,，應(yīng)再次離心,。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,，檢測(cè)前先離心或過(guò)濾,。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。

豚鼠(TIMP-1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 ELISA性能：

1.  準(zhǔn)確性：標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,，大于等于0.9900,。

2.  靈敏度：0.1 ng/mL,。

3.  特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng),。

4.  重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%,。

5.  貯藏：2-8℃,，避光防潮保存。

操作注意事項(xiàng)：

1.  試劑盒保存在2-8℃,，使用前室溫平衡20分鐘,。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶，這屬于正?，F(xiàn)象,，水浴加熱使結(jié)晶溶解后再使用。

2.  實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,，密封（低溫干燥）保存,。

3.  濃度為0的S0號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品即可視為陰性對(duì)照或者空白；按照說(shuō)明書操作時(shí)樣本已經(jīng)稀釋5倍,，最終結(jié)果乘以5才是樣本實(shí)際濃度,。

4.  嚴(yán)格按照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作,。

5.  所有液體組分使用前充分搖勻,。