【摘要】：cGMP是一種具有細(xì)胞內(nèi)信息傳遞作用的第二信使,，廣泛分布于各種組織中,，其含量約為（cAMP）的1/10～1/100,。cGMP與cAMP的作用相反，具有多種生物效應(yīng),，包括抑制心肌收縮力,、降低心率、增加神經(jīng)興奮性,、刺激白細(xì)胞溶酶體釋放水解酶,、刺激淋巴細(xì)胞分裂增殖、抑制糖異生以及興奮副交感神經(jīng)等,。

檢測(cè)原理：試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）,。往預(yù)先包被環(huán)鳥(niǎo)苷一磷酸腺苷一磷酸（cGAMP）抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本,、標(biāo)準(zhǔn)品,、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過(guò)溫育并洗滌,。用底物TMB顯色,，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的環(huán)鳥(niǎo)苷一磷酸腺苷一磷酸（cGAMP）呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值），計(jì)算樣品濃度,。

大鼠(cGAMP)ELISA檢測(cè)試劑盒 定量分析組成及其配置：

大鼠(cGAMP)ELISA檢測(cè)試劑盒 定量分析操作步驟：

1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃,。

2.  設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；

3.  樣本孔先加待測(cè)樣本10μL,，再加稀釋液40μL,；空白孔不加。

4.  除空白孔外,，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。

5.  棄去液體,，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液,，靜置1min,，甩去洗滌液，吸水紙上拍干,，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）,。

6.  每孔加入底物A,、B各50μL，37℃避光孵育15min,。

7.  每孔加入終止液50μL,，15min內(nèi)，在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值,。