【摘要】：蛻皮激素,，又稱脫皮激素或蛻皮甾酮,，是一種從鴨跖草科植物珍珠露水草（Cyanotis arachnoidea C. B. Clarke）根部提取得到的活性物質(zhì)。在蠶業(yè)養(yǎng)殖中,，用于促使桑蠶齡期縮短，上簇整齊,，促進(jìn)吐絲結(jié)繭,；在水產(chǎn)養(yǎng)殖中，促進(jìn)蝦,、蟹等水生甲殼類順利脫殼,，提高養(yǎng)殖成活率和商品規(guī)格。

檢測原理：試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）,。往預(yù)先包被蛻皮激素(Ecdysone)抗體的包被微孔中,，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品,、HRP標(biāo)記的檢測抗體,，經(jīng)過溫育并洗滌,。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的蛻皮激素(Ecdysone)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值）,，計算樣品含量,。

樣品收集、處理及保存方法：蝦蛻皮激素(Ecdysone)ELISA檢測試劑盒

1.  血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離,。

2.  血漿：EDTA,、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清,。

3.  細(xì)胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物,。

4.  組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清,。

5.  保存：如果樣本收集后不及時檢測,，請按一次用量分裝，凍存于-20℃,，避免反復(fù)凍融,，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

蝦蛻皮激素(Ecdysone)ELISA檢測試劑盒操作注意事項：

1.  實驗操作中必須使用一次性吸頭,，避免交叉污染,。

2.  加樣：加樣時，要控制加樣速度,，避免第一孔與最后一孔間的時間間隔過大,，否則將會導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時間，從而影響實驗的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性,。

3.  孵育：嚴(yán)格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進(jìn)行,。 

4.  反應(yīng)時間的控制：加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化，如果顏色較深,，請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng),。

5.  建議實驗前預(yù)測樣品含量，如樣品濃度過高,，應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,，計算結(jié)果時乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。 

6.  建議使用本試劑盒時先做預(yù)實驗（即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線,，試用幾個標(biāo)本）,，如果對本試劑盒有任何疑問,，可和所購經(jīng)銷商聯(lián)系，如果因運輸過程導(dǎo)致試劑盒失效,，可要求調(diào)換,，但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。