摘要：促卵泡素(FSH)是一個(gè) 35.5 kDa 的糖蛋白異構(gòu)體,，由兩個(gè)多肽單元 組成,，即α和β。其結(jié)構(gòu)與黃體生成素（LH）,、促甲狀腺激素（TSH）和（hCG）的結(jié)構(gòu)相似,。LH、FSH,、TSH 和 hCG 糖蛋白的α 亞單位是相同的,。FSH 有一個(gè) 111 個(gè)氨基酸的β亞單位（FSH β），賦予其 特定的生物作用,，并負(fù)責(zé)與卵泡刺激素受體相互作用,。激素的糖類部分與天 冬酰胺共價(jià)鍵合，由 N-乙酰半乳糖胺,、甘露糖,、N-乙酰葡萄糖胺、半乳糖 和唾液酸組成,。

檢測原理：試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）,。往預(yù)先包被促卵泡素（FSH）抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本,、標(biāo)準(zhǔn)品,、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并洗滌,。用底物TMB顯色,，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的促卵泡素（FSH）呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計(jì)算樣品濃度,。

樣品收集,、處理及保存方法：魚促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒 定量檢測

1.  血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,，收集血液后,，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2.  血漿：EDTA,、檸檬酸鹽或肝素抗凝,。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。

3.  細(xì)胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物,。

4.  組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。

5.  保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測,，請按一次用量分裝,，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融,，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。

魚促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒 定量檢測技術(shù)小提示：

1.      當(dāng)混合或重溶蛋白溶液時(shí)，盡量避免起沫,。

2.      為了避免交叉感染,，配置不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品、上樣,、加不同試劑都需要更換槍頭,。另外不同試劑請分別使用不同的移液槽,。

3.      每次孵育時(shí)，請正確使用封板膠可保證結(jié)果的準(zhǔn)確性,。

4.      混合后的顯色底物在上板前應(yīng)為無色,，請避光保存；假如微孔板后,，將由物色變成不同深度的藍(lán)色,。

5.      終止液上板順序應(yīng)同顯色底物上板順序一致；加入終止液后,，孔內(nèi)顏色由藍(lán)變黃,；若孔內(nèi)有綠色，則表明孔內(nèi)液體未混勻,；請充分混合,。