【核因子κB受體活化因子配基(RANKL)簡介】：是一種由TNFSF基因編碼的蛋白質(zhì)。RANKL為腫瘤壞死因子超家族的一員,，屬于第二型穿膜蛋白,。可以影響免疫系統(tǒng)和調(diào)控骨質(zhì)新生和重塑,。RANKL在骨骼的新陳代謝方面,，扮演著相當(dāng)重要的角色,。他是造骨細(xì)胞（osteoblast）膜上的一種膜蛋白，可以活化蝕骨細(xì)胞,，會加速蝕骨細(xì)胞破壞骨質(zhì)并被吸收,，為骨質(zhì)更新的重要一環(huán)。當(dāng)造骨細(xì)胞膜上的RANKL,，活化了蝕骨細(xì)胞膜上的RANK蛋白,，蝕骨作用就會開始。

【產(chǎn)品用途】：本試劑盒僅供科研使用,，定量檢測細(xì)胞液,、體液、組織,、血清,、血漿等標(biāo)本中大鼠核因子κB受體活化因子配基的含量。凡訂購我司任意一款試劑盒均享受免費代測服務(wù),，歡迎咨詢,、訂購！

檢測原理：試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）,。往預(yù)先包被核因子κB受體活化因子配基（RANKL）抗體的包被微孔中,，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品,、HRP標(biāo)記的檢測抗體,，經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色,，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的核因子κB受體活化因子配基（RANKL）呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值）,，計算樣品濃度。

檢測前準(zhǔn)備工作：大鼠核因子κB受體活化因子配基ELISA試劑盒

1. 請?zhí)崆?0分鐘從冰箱中取出試劑盒,，平衡至室溫,。

2. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶，屬于正?，F(xiàn)象,；放置室溫，輕搖均勻,，待結(jié)晶溶解后再配置洗滌液,?？蓪?0ml濃縮洗滌液用蒸餾水或去離子水稀釋配置成400ml工作濃度的洗滌液,，未用完的放回4℃

3. 20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋,，即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水,。

大鼠核因子κB受體活化因子配基ELISA試劑盒操作注意事項：

1.  實驗操作中必須使用一次性吸頭，避免交叉污染,。

2.  加樣：加樣時,，要控制加樣速度，避免第一孔與最后一孔間的時間間隔過大,，否則將會導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時間,，從而影響實驗的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性。

3.  孵育：嚴(yán)格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進(jìn)行,。 

4.  反應(yīng)時間的控制：加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化,，如果顏色較深，請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng),。

5.  建議實驗前預(yù)測樣品含量，如樣品濃度過高,，應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,，計算結(jié)果時乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。 

6.  建議使用本試劑盒時先做預(yù)實驗（即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線,，試用幾個標(biāo)本）,，如果對本試劑盒有任何疑問，可和所購經(jīng)銷商聯(lián)系,，如果因運(yùn)輸過程導(dǎo)致試劑盒失效,，可要求調(diào)換，但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失,。