【腫瘤壞死因子α（TNF-α）簡介】：由中性粒細胞、活化的淋巴細胞,、巨噬細胞,、NK細胞、LAK細胞,、星形膠質(zhì)細胞內(nèi)皮細胞,、平滑肌細胞和一些轉(zhuǎn)化細胞產(chǎn)生。自然發(fā)生的TNF-α形式是糖基化的,，但非糖基化的重組TNF-α具有相當(dāng)?shù)纳锘钚?。?jù)報道，TNF-α的生物活性原生形式是一個三聚體,。

【產(chǎn)品用途】：本試劑盒僅供科研使用,，定量檢測細胞液、體液,、組織,、血清、血漿等標(biāo)本中雞腫瘤壞死因子α(TNF-α)的含量,。凡訂購我司任意一款試劑盒均享受免費代測服務(wù),，歡迎咨詢、訂購,！

實驗材料與試劑配制：

1.  儀器與材料：酶標(biāo)儀（使用前預(yù)熱30分鐘）,，微量加液器、吸頭,、蒸餾水或去離子水,，濾紙。

2. 20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋,，即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水,。

樣品收集,、處理及保存：雞腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA檢測試劑盒

【細胞培養(yǎng)上清】：適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液,，以1000×g離心15分鐘,，收集上清。

【血清】：在室溫下,，血液自然凝固,，以1000×g離心15分鐘，取上清待測,。

【血漿】：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,，混合后靜置10-20 分鐘后，以1000×g離心15分鐘,，收集上清,。

【體液】：包括胸腹水、腦脊液,，分泌物等,。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,，以1000×g離心15分鐘,，收集上清。

【樣本要求】：樣品中不能含有NaN3,，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性,。

【樣本保存】：如果樣品不能立即檢測，應(yīng)將其分裝,，-80 ℃保存,，避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,，應(yīng)再次離心,。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,，檢測前先離心或過濾,。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。

雞腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA檢測試劑盒性能：

【準(zhǔn)確性】：標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,，大于等于0.9900。

【檢測范圍】：請咨詢我司銷售人員領(lǐng)取說明書

【靈敏度】：zui低檢測濃度小于1.0pg/ML

【特異性】：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)

【重復(fù)性】：板內(nèi),、板間變異系數(shù)均小于15%

洗板方法：

1.  手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體,，每孔加滿洗滌液，靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體,，在吸水紙上拍干,，如此洗板5次,。

2.  自動洗板機：每孔注入洗液350μL，浸泡1min,，洗板5次,。

技術(shù)小提示：

1.      當(dāng)混合或重溶蛋白溶液時，盡量避免起沫,。

2.      為了避免交叉感染,，配置不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品、上樣,、加不同試劑都需要更換槍頭,。另外不同試劑請分別使用不同的移液槽。

3.      每次孵育時,，請正確使用封板膠可保證結(jié)果的準(zhǔn)確性,。

4.      混合后的顯色底物在上板前應(yīng)為無色，請避光保存,；假如微孔板后,，將由物色變成不同深度的藍色。

5.      終止液上板順序應(yīng)同顯色底物上板順序一致,；加入終止液后,，孔內(nèi)顏色由藍變黃；若孔內(nèi)有綠色,，則表明孔內(nèi)液體未混勻,；請充分混合。

上海軒澤康生物ELISA試劑盒種類繁多,，根據(jù)產(chǎn)品名稱原理大致分為間接法,、夾心法、競爭法,、捕獲包被法（也稱為反向間接法,，比較少見）。其中各類型試劑盒的基本原理可電詢我司業(yè)務(wù)人員進行詳細了解,。以下是關(guān)于各類型ELISA試劑盒及適用類型：

①間接法：測定總抗體或IgG抗體

②抗體夾心法：測定二價或二價以上大分子抗原

③抗原夾心法：測定抗體

④抗體競爭法：測定抗體

⑤抗原競爭法：測定只有一個抗原決定簇的小分子半抗原

⑥捕獲包被法：測定IgM,傳染病的早期診斷