產(chǎn)品簡介：軒澤康豬附紅細(xì)胞體病ELISA試劑盒 定性檢測

【產(chǎn)品規(guī)格】：96T/盒：zui多可檢測90個樣本,；48T/盒：zui多可檢測42個樣本

【保存條件】：2-8℃,，避光防潮儲存

【檢測目的】：定性檢測

【實驗儀器】：酶標(biāo)儀

【檢測方法】：雙抗一步夾心法

【待檢樣本】：組織勻漿、細(xì)胞上清液,、血清,、血漿等

【特色服務(wù)】：免費代測ELISA實驗、支持定制

檢測原理：試劑盒采用雙抗一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）,。往預(yù)先包被豬附紅細(xì)胞體病IgG抗體的包被微孔中,，依次加入標(biāo)本、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并洗滌,。用底物TMB顯色,，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色,。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD 值）,，與CUT OFF值相比較，從而判定標(biāo)本中豬附紅細(xì)胞體?。‥perythrozoonosis）的存在與否。

樣品收集,、處理及保存方法：

1.  血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后,，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離,。

2.  血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝,。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清,。

3.  細(xì)胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4.  組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清,。

5.  保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝,，凍存于-20℃,，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。

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軒澤康豬附紅細(xì)胞體病ELISA試劑盒 定性檢測結(jié)果判斷：

 1.  試驗有效性：陽性對照孔OD值平均值≥1.00,；

                陰性對照孔OD值平均值≤0.15。

2.  臨界值（Cut off）計算：臨界值=陰性對照孔平均值+0.15

3.  陰性判斷：樣品OD值＜臨界值（Cut off）,，樣品為陰性

4.  陽性判斷：樣品OD值＞臨界值（Cut off）,，樣品為陽性

試劑盒性能：

1.  準(zhǔn)確性：陽性對照孔OD值平均值≥1.00；陰性對照孔OD值平均值≤0.15,，說明試驗結(jié)果有效,。

2.  特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng),。

3.  重復(fù)性：板內(nèi),、板間變異系數(shù)均小于15%。

常見問題解答：

1.     【高背景或陰性對照值偏高】

可能的原因：陰性對照孔被陽性對照或樣品污染；抗體非特異性結(jié)合,；酶結(jié)合物過濃；孵育溫度過高,；底物在使用前曝光；讀板前停留時間過長

上海軒澤康生物為您提供解決方案：洗滌時勿將洗液溢出孔外,；建議更換封閉液,；檢查酶結(jié)合物是否按照說明書規(guī)定稀釋,；檢查孵育箱的溫度是否正確,、穩(wěn)定；應(yīng)保存在暗處,、避光,；加終止液后3分鐘內(nèi)讀數(shù)。

2.     【陽性對照值偏低或低吸光度】

可能的原因: 試劑未平衡至室溫;檢測體積偏小;孵育時間過短;底物受污染;樣本中有抑制劑,。

上海軒澤康生物為您提供解決方案：實驗開始前,，將試劑盒從冰箱內(nèi)取出平衡至室溫（20-25℃）；檢查移液器吸液通道是否堵塞,；使用計時器,，準(zhǔn)確孵育時間；使用新配置的試劑,，重新實驗,；疊氮鈉會抑制HRP酶的活性。

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