豬肺炎支原體(MP)ELISA檢測試劑盒 競爭法在國內(nèi)眾多實(shí)驗(yàn)室被廣泛使用,，深受廣大科研者的好評。上海軒澤康生物專ye供應(yīng)酶聯(lián)免疫分析試劑盒,，部分現(xiàn)貨供應(yīng)產(chǎn)品有人,、大鼠、小鼠,、兔,、豬、犬,、雞,、猴、植物等ELISA試劑盒,。所有elisa試劑盒均提供免費(fèi)代測,，實(shí)驗(yàn)全程提供技術(shù)指導(dǎo)。歡迎咨詢,、訂購,！

試劑盒性能：

準(zhǔn)確性：標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,，大于等于0.9900。

靈敏度：zui低檢測濃度小于0.25ng/mL,。

特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。

重復(fù)性：板內(nèi),、板間變異系數(shù)均小于15%,。

檢測原理：試劑盒采用競爭法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被肺炎支原體（MP）抗體的包被微孔中,，依次加入標(biāo)本,、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的競爭抗原,，經(jīng)過溫育并洗滌,。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的肺炎支原體（MP）呈負(fù)相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值）,，計算樣品濃度,。

豬肺炎支原體(MP)ELISA檢測試劑盒 競爭法組成及其配置：

注：標(biāo)準(zhǔn)品（S0-S5）濃度依次為：0、1,、2,、4、8,、16 ng/mL

試劑的準(zhǔn)備：20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋,，即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。

洗板方法：

1.  手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體,，每孔加滿洗滌液,，靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體，在吸水紙上拍干,，如此洗板5次,。

2.  自動洗板機(jī)：每孔注入洗液350μL，浸泡1min,，洗板5次,。

操作步驟：

1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃,。

2.  設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；

3.  樣本孔先加待測樣本10μL,，再加稀釋液40μL,；空白孔不加,。

4.  除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的競爭抗原50μL,，用封板膜封住反應(yīng)孔,，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.  棄去液體,，吸水紙上拍干,，每孔加滿洗滌液，靜置1min,，甩去洗滌液,，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）,。

6.  每孔加入底物A,、B各50μL，37℃避光孵育15min,。

7.  每孔加入終止液50μL,，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值,。