斑馬魚(Casp-3)ELISA檢測試劑盒 科研實(shí)驗(yàn)用檢測原理:試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被（Casp-3）抗體的包被微孔中,，依次加入標(biāo)本,、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,，經(jīng)過溫育并洗滌,。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的（Casp-3）呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計(jì)算樣品濃度,。

使用常識(shí)：

1.試劑有強(qiáng)腐蝕性,、等特性，切忌與手直接接觸

2.要用潔凈的藥勺,、量筒或滴管取用試劑,，絕不允許用同一種工具同時(shí)連續(xù)取用多種試劑。取完一種試劑后,，應(yīng)將工具洗凈（藥勺要擦干）后,，才可取用另一種試劑。

3.已經(jīng)取出的試劑不能再放回原試劑瓶內(nèi)（怕產(chǎn)生原試劑的再次污染）

4. 試劑取用后一定要將瓶塞蓋緊,，不可放錯(cuò)瓶蓋或滴管,。用完后請(qǐng)及時(shí)將瓶放回原處以免遺忘帶來不便。

斑馬魚(Casp-3)ELISA檢測試劑盒 科研實(shí)驗(yàn)用操作步驟：

1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,，剩余板條用自封袋密封放回4℃,。

2.  設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL,；

3.  樣本孔先加待測樣本10μL,，再加稀釋液40μL；空白孔不加

4.  除空白孔外,，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL,，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。

5.  棄去液體,，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液,，靜置1min,，甩去洗滌液，吸水紙上拍干,，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）,。

6.  每孔加入底物A、B各50μL,，37℃避光孵育15min,。

7.  每孔加入終止液50μL，15min內(nèi),，在450nm波長處測定各孔的OD值,。