目錄:北京蘭博利德商貿(mào)有限公司>>蛋白研究>>蛋白純化>> M1607G-25支/盒G25離心脫鹽柱
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 貨號 | M1607G |
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G25 脫鹽離心柱（0.7ml）
貨號：M1607
存儲條件：4-30度保存
產(chǎn)品簡介
LABLEAD G25離心脫鹽柱的介質(zhì)是一類以葡聚糖為基質(zhì)的凝膠過濾層析介質(zhì)，其工作原理主要是利用具有網(wǎng)狀結(jié)構的葡聚糖凝膠的分子篩作用,根據(jù)被分離物質(zhì)的分子大小不同來進行分離,。G25離心脫鹽柱，對鹽和小分子的滯留率在95%以上,，幾乎等體積回收,，樣品不會被稀釋可以在出色地完成蛋白質(zhì)脫鹽的同時保持ji高的回收率。無需裝柱代替比較耗時的傳統(tǒng)透析處理,，以達到快速純化蛋白質(zhì)/替換蛋白質(zhì)緩沖液的目的,。只需簡單的幾次離心，即可完成樣品的脫鹽或緩沖液置換實驗,。
性能 | 指標 |
裝填介質(zhì) | Chromrose G25 |
裝填體積 | 0.5ml |
最大上樣量 | 200ul |
脫鹽效率 | ＞85% |
排阻體積 | Mr5000 |
工作pH | 2~13 |
產(chǎn)品用途
1,、脫鹽
將蛋白質(zhì)同其他鹽類小分子分離開來，廣義的脫鹽還包括去除其他的化學小分子,，包括咪嘩,、GSH、苯fen等,。
2,、緩沖液置換
將蛋白溶液從現(xiàn)有溶液置換到更合適的緩沖液中。比如離子交換,、電泳等應用的前處理,。
3、樣品清除
將樣品中的某些組分去除,，避免對目標產(chǎn)物的影響，包括質(zhì)譜樣品預處理,、化學交聯(lián)或標記單體的去除等等,。
產(chǎn)品特點
1,、操作方便，免去了繁瑣的透析過程,，10分鐘內(nèi)即可完成樣品處理,。
2、建議一次性使用(也可再生后重復使用),，穩(wěn)定性好,，在所用常用緩沖液體(PBS，Tris-Cl,、碳酸鈉一碳suan氫鈉等)中穩(wěn)定,。
操作步驟
提前準備1.5mL或2mL離心管當做收集管。
1,、平脫鹽柱
1)將離心脫鹽柱下方堵頭去除,，先向一個方向輕微扭轉(zhuǎn)，再向另一個方向扭轉(zhuǎn),，然后放回收集管中,，1000xg離心1分鐘，倒掉收集管中保護液,。
2) 將離心柱重新放回收集管中,，向離心柱中加入250ul平衡液(樣品脫鹽后想要置換的緩沖液)，靜置待平衡液全部滲入填料后,，1000xg離心1分鐘,，重復三次，去除收集液,。
2,、樣品處理
將離心柱放入干凈的EP管中,加入100ul~200ul樣品，靜置3min,，1000xg離心1分鐘,，EP管中溶液即為脫鹽后的樣品。
3,、脫鹽柱的再生和保存將使用過的脫鹽柱,，加入300ul 0.5M NaOH溶液，靜置2min,，1000xg離心1min,，重復兩次。然后加入300ul去離子水,，靜置2min,，1000xg離心1min，重復三次。將處理好的脫鹽柱,，加入20%乙醇溶液,，下端放上紅色堵頭，擰緊蓋子4~30°C保存即可,。
回收效果
樣品脫鹽后的回收率與樣品的濃度,，以及上樣體積相關。樣品濃度越高,，其回收率越高,；同時在推薦的樣品上樣量范圍內(nèi)，上樣量越大,，其回收率也會隨之升高,。通常脫鹽后蛋白的回收率在80%~95%。
注意事項
1,、為了防止可能的離子相互作用,，建議在脫鹽期間和最終樣品緩沖液保持低鹽濃度(25mM NaCl)。如果需要避免NaCl的存在可以使用揮發(fā)性緩沖劑,，例如100mM乙酸銨或100 mM碳酸氫銨,；
2、樣品處理量要在柱子處理范圍內(nèi),過多會導致脫鹽不wan全,過少會導致樣品回收率下降,；
3,、填料在高濃度醇溶液或飽和鹽溶液中會有失水收縮現(xiàn)象，請勿將上述溶液進行過柱,；
4,、加樣時盡量均勻加至管中心位置；
5,、當樣品濃度過低時,需先將樣品濃縮到所需體積或所需濃度,。
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