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DAPI染料

產(chǎn)品貨號(hào)：DAPI01-1

儲(chǔ)存條件：2-8℃,。常溫運(yùn)輸,。粉末在室溫下穩(wěn)定,，需避光儲(chǔ)存,。

產(chǎn)品描述

DAPI是一種可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料。和雙鏈DNA結(jié)合后可以產(chǎn)生比DAPI自身強(qiáng)20多倍的熒光,。和EB(ethidium bromide)相比,，對(duì)雙鏈DNA的染色靈敏度要高很多倍。DAPI染色常用于細(xì)胞凋亡檢測(cè),，染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測(cè),。DAPI也常用于普通的細(xì)胞核染色以及某些特定情況下的雙鏈DNA染色。DAPI的最da激發(fā)波長(zhǎng)為340nm,，最da發(fā)射波長(zhǎng)為488nm,；DAPI和雙鏈DNA結(jié)合后，最da激發(fā)波長(zhǎng)為364nm,，最da發(fā)射波長(zhǎng)為454nm,。本DAPI溶液用水配制，加熱有助于溶解。

用于細(xì)胞核染色時(shí),，推薦的DAPI工作濃度為0.5-10μg/ml,。

配制母液

用雙蒸水溶解，終濃度為1mg/ml,。本產(chǎn)品不可以用緩沖液直接溶解,。-20℃可保存1年，建議分裝保存,，避免反復(fù)凍融,。

使用方法

1.配制工作液：用雙蒸水或PBS稀釋母液，配制成所需要的工作的濃度（0.5-10μg/ml）,。

2.固定的細(xì)胞或組織染色：

對(duì)于固定的細(xì)胞或組織樣品,，固定后，適當(dāng)洗滌去除固定劑,。DAPI染色通常在其他染色的最后進(jìn)行,。如果不需要進(jìn)行其它染色，則直接進(jìn)行DAPI染色,。

a)對(duì)于貼壁細(xì)胞或組織切片：加入適量DAPI染色液,，覆蓋住樣品即可。

對(duì)于懸浮細(xì)胞：至少加入待測(cè)染色樣品體積3倍的染色液,，混勻,。室溫放置3-5分鐘。

b)吸除DAPI染色液,，用TBST,、PBS或生理鹽水洗滌2-3次，每次3-5分鐘,。

c)直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察,。激發(fā)波長(zhǎng)360nm，發(fā)射波長(zhǎng)460nm,。

3.活細(xì)胞或組織染色：

a)細(xì)胞培養(yǎng)物中加入適量DAPI染色液,，約1/10細(xì)胞培養(yǎng)基體積，必須充分覆蓋住待染色的樣品,。通常對(duì)于六孔板一個(gè)孔需加入1ml染色液,，對(duì)于96孔板一個(gè)孔需加入100μl染色液。

b)在37℃培養(yǎng)細(xì)胞 10～20 分鐘,。

c)用PBS或合適的緩沖液洗細(xì)胞兩次,。

d)直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。激發(fā)波長(zhǎng)360nm,，發(fā)射波長(zhǎng)460nm,。

注意事項(xiàng)

1)DAPI對(duì)人體有一定刺激性,，請(qǐng)注意適當(dāng)防護(hù)。

2)熒光染料都存在淬滅的問(wèn)題,，建議染色后盡量當(dāng)天完成檢測(cè),。

3)為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。

4)為了您的安全和健康,，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作,。