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熒光染料NO.33258

產(chǎn)品貨號：B2883-1

存儲條件：?20℃ ，保質(zhì)期3年

產(chǎn)品描述

熒光色素,；用于DNA,、染色體和核酸的染色；熒光染色法和免疫熒光技術(shù),。Hoechst 33258 是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料,，它在嵌入雙鏈 DNA 后釋放強烈的藍色熒光,，對細胞的毒性較低。Hoechst 33258 常用于細胞凋亡檢測,，染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測,，也可以用于普通的細胞核染色，或常規(guī)的DNA染色,。

產(chǎn)品性質(zhì)

物理性狀

黃色至深黃色粉末；溶于水,，黃或棕色溶液,，參考濃度為9.80 - 10.20 mg/ml；熔點＞300℃,。

用途

細胞遺傳學研究的常用試劑,，熒光染色細胞的DNA ，插入DNA的A-T區(qū),，具有低的細胞毒性,，形成膜滲透性熒光DNA鏈。用于細胞核染色時,，推薦的Hoechst 33258工作濃度為0.5-10μg/ml,。

配制母液

Hoechst 33258溶于水，溶解度可達10mg/ml,。因此可配制成10mg/ml的母液于4℃避光保存,。

注意事項

1) Hoechst 33258 對人體有一定刺激性，請注意適當防護,。

2) 熒光染料都存在淬滅的問題,，建議染色后盡量當天完成檢測。

3) 為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液,。

4) 為了您的安全和健康,，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

5）本產(chǎn)品僅作科研用途,！

使用方法     

1.用PBS或合適的緩沖液制備10～50µM Hoechst 33258染色液,。

2.固定的細胞或組織染色：

對于固定的細胞或組織樣品，固定后,，適當洗滌去除固定劑,。隨后如果需要進行免疫熒光染色，則先進行免疫熒光染色,，染色完畢后再按后續(xù)步驟進行Hoechst33258染色,。如果不需要進行其它染色，則直接進行后續(xù)的Hoechst 33258染色。

a)對于貼壁細胞或組織切片：加入適量Hoechst 33258染色液,，覆蓋住樣品即可,。對于懸浮細胞：至少加入待測染色樣品體積3倍的染色液，混勻,。室溫放置3-5分鐘,。

b)吸除Hoechst 33258染色液，用TBST,、PBS或生理鹽水洗滌2-3次,，每次3-5分鐘。

c)直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察,。激發(fā)波長350nm,，發(fā)射波長460nm。

3.活細胞或組織染色：

a)細胞培養(yǎng)物中加入適量Hoechst 33258染色液,，約1/10細胞培養(yǎng)基體積,，必須充分覆蓋住待染色的樣品。通常對于六孔板一個孔需加入1ml染色液,，對于96孔板一個孔需加入100μl染色液,。

b)在 37℃培養(yǎng)細胞 10～20 分鐘。

c)用 PBS或合適的緩沖液洗細胞兩次。

d)直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。激發(fā)波長350nm,，發(fā)射波長460nm。