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LabFect 質粒DNA轉染試劑

貨號：T2113

存儲條件：: 4-8℃保存,，有效期一年,。每次使用之前請先將本品上下顛倒混勻。

產品說明：

LabFect Plasmid質粒DNA轉染試劑是專門用于質粒DNA細胞轉染的轉染試劑,。LabFect Plasmid 具有非常卓yue的轉染性能,，可高效轉染多種貼壁細胞、原代細胞和懸浮細胞,，轉染效率在貼壁細胞中高達90%以上（EGFP質粒）,。LabFect Plasmid 不僅可轉染較大分子的質粒DNA，還可轉染RNA和小分子DNA,。與目前市場上常見的脂質體轉染試劑不同,，LabFect Plasmid 采用生物可降解材料配制，對細胞的毒性很低,，轉染后細胞死亡率不到10%,。LabFect Plasmid 使用也非常方便，先將轉染試劑與質粒DNA混合,，再將轉染試劑-DNA復合物直接加入培養(yǎng)細胞中,，血清不影響其轉染效果，不必刻意添加或更換培養(yǎng)液,，操作十分簡便,。

產品特點：

卓yue的細胞轉染性能：可高效轉染多種原代細胞，轉染效率高達70%以上,；

極低的細胞毒性：使用可降解生物材料,，細胞毒性低，轉染細胞死 亡率不到10%,，大大降低了因細胞毒性對實驗結果的影響,，實驗結果更為客觀；

操作簡便,，可用于含血清培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞的轉染,，轉染前后不需要更換培養(yǎng)液。

注意事項：

因細胞密度隨細胞系不同會有很大差別,，且細胞密度直接決定轉染效率,，因此請在轉染過程中盡量保持同樣的接種比例,，以提高轉染重復性。多數哺乳動物細胞應在37℃,、5%CO2條件下培養(yǎng),。其他的一些細胞系，例如昆蟲細胞,，需要在不同的溫度和CO2濃度下進行培養(yǎng),。請根據具體細胞系選擇最shi培養(yǎng)條件。應避免包裝反應體系中存在血清,，因血清會干擾LabFect與DNA形成復合物 ,。如果轉染DNA量較大或者當復合物包裝時反應體系中出現沉淀時, 請將包裝反應體系調整至1ml進行。

適用細胞系： 293T,，A549,，B16F10，HEK 293,，HeLa,，Hepa 1-6，Hepa 1cLc7,，HepG2,，BHK-21，BNL.CL2,，BRL-3A,，C2C12，C6,， CHO-K1，Clone 9,，COS-1,，COS-7，Daoy,，DBTRG-05MG,，DI- TNC1，DU 145,，HLF-a,，Huh-7，K562,，KB,，KLN 205，Lυ2 (LLC1),，NCaP-FGC,，MCF-7,，MEL，Neuro-2a,，NIH3T3,，OVCAR3，PC3,，PC-12,，等。

試劑盒內容物：LabFect 質粒DNA轉染試劑

方法步驟（以24孔板轉染為例）:

1. 細胞接種:

a. 轉染前24小時左右對細胞進行鋪板（不含抗生素）,，培養(yǎng)過夜,；

b. 確保轉染時細胞密度達90%-95%。

2. LabFect/DNA復合物包裝(該步完成后應立即轉染):

a. 在1.5 ml無菌離心管中加入50µl無血清培養(yǎng)基,，并添加適量的轉染 試劑(參見附表) ,。用移液器輕輕混勻后在室溫靜置5分鐘。

b. 在1.5 ml無菌離心管中加入50µl無血清培養(yǎng)基,，并添加適量的DNA,，用移液器輕輕混勻后在室溫靜置5分鐘。 (參見附表,。首ci使用建議在附表提供的DNA和轉染試劑參考量的基礎上進行優(yōu)化實驗,，以摸索兩者之間的最you搭配比例)。

c. 將LabFect-培養(yǎng)基混合物滴加至DNA-培養(yǎng)基混合物中,，用移液器 輕輕混勻后在室溫靜置15~20分鐘后,，立即轉染。注意： LabFect-培養(yǎng)基混合物和DNA-培養(yǎng)基混合物的混合次序非常重要,，切勿顛倒,。

3. 轉染:

注意：LabFect在*培養(yǎng)基中(基礎培養(yǎng)基中添加血清)具有最gao的轉染效率，因此轉染前后不需要換成無血清培養(yǎng)基,。 a. 如特殊情況,，可在轉染開始之前更換新鮮的含血清培養(yǎng)基，以防轉染后孵育階段細胞密度太大,、營養(yǎng)不足導致的細胞死亡,。

b. 將步驟2制備的復合物滴加至培養(yǎng)基中。輕輕晃動培養(yǎng)皿以使復合物均勻分布,。

c. 培養(yǎng)4h后,，加入1ul溶液A，輕搖混勻（此步可選,，溶液A另購）,。

d. 過夜培養(yǎng)24~48小時。

e. 注意:如果轉染后需要更換新鮮培養(yǎng)基,，請于加入LabFect/DNA復合物12~24小時后進行,。培養(yǎng)基更換后,，孵育24~48小時后再進行后續(xù)實驗。

f. 收獲細胞,，進行后續(xù)實驗,。

質量控制

本產品經嚴格的質量檢驗證明，無生物污染

注意：

本產品僅用于科研實驗

附表：不同培養(yǎng)體系推薦初始轉染條件