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當(dāng)前位置:上??撇┤鹕锟萍加邢薰?/a>>>技術(shù)文章>>淺談保存胎牛血清的正確的方式
胎牛血清從上市以來一直備受爭議,,從廠家,價格,,鑒別到產(chǎn)品質(zhì)量,,產(chǎn)品如何正確的保存都是些大問題,今天科博瑞生物就帶領(lǐng)大家一起來學(xué)習(xí)如何正確的使用和保存血清,。
標(biāo)準(zhǔn)血清的鑒別方法:
血清凝固析出的淡黃色透明液體,,如將血液自血管內(nèi)抽出,放入試管中,,不加抗凝劑,,血液迅速凝固,形成膠凍,。其周圍所析出之淡黃色透明液體即為血清,,也可于凝血后經(jīng)離心取得。在凝血過程中,,纖維蛋白原轉(zhuǎn)化成維蛋白塊,,所以血清中無纖維蛋白原,這一點是與血漿的區(qū)別,。而在凝血反應(yīng)中,,血小板釋放出許多物質(zhì)。這些成分都留在血清中并繼續(xù)發(fā)生變化,,并隨血清存放時間逐漸減少以至消失,。這些也都是與血漿區(qū)別之處。但大量未參加凝血反應(yīng)的物質(zhì)則與血漿基本相同,。為避免抗凝劑的干擾,,血液中許多化學(xué)成分的分析,都以血清為樣品。
胎牛血清的作用:
胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量zui大的天然培養(yǎng)基,,含有豐富的細(xì)胞生長必須的營養(yǎng)成份,,常用于動物細(xì)胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能,。
血清保存要點:
1.需要長期保存的血清必須儲存于-20℃-70℃的低溫冰箱中,。4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月,由于血清結(jié)冰時體積會增加約10%,,因此,血清在凍于低溫冰箱前,,必須預(yù)留一定體積空間,,否則易發(fā)生污染或者玻璃瓶凍裂。
2.熱滅活是指56℃,,30分鐘加熱已解凍的血清,,加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻,此熱處理的目的是使血清中的補(bǔ)體成分滅活,。除非必須,,一般不建議作此熱處理,因為熱處理會造成血清沉淀物顯著增多,,而且還會影響血清的質(zhì)量,。補(bǔ)體參與反應(yīng)有:細(xì)胞毒作用, 平滑肌細(xì)胞收縮, 肥大細(xì)胞和血小板釋放組胺, 增強(qiáng)吞噬作用, 促進(jìn)淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞發(fā)生化學(xué)趨化和活化。
3.瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天,。然后移入室溫,,待全部溶解后再分裝。在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),,使溫度與成分均一,,減少沉淀的發(fā)生。切勿直接將血清從-20℃進(jìn)入37℃解凍,,這樣因溫度改變太大,,容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀。
4.一般廠商提供的血清為無菌,,無需再過濾除菌,。如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過濾,,切勿直接過濾血清,。
5.血清中的沉淀物,絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,,這些絮狀物不會影響血清本身的質(zhì)量,。可用離心3000rpm, 5分鐘去除,,也可不用處理,。 顯微鏡下"小黑點":經(jīng)過熱處理過的血清,沉淀物的形成會顯著增多。有些沉淀物在顯微鏡下觀察象“小黑點",常誤認(rèn)為血清受污染,。一般情況下,,此小黑點不會影響細(xì)胞生長,但如果懷疑血清質(zhì)量,,則應(yīng)立即停止使用,,更換另一批號的血清。
6.切勿將血清在37℃放置太久,,否則血清會變得渾濁,,同時血清中的有效成分會破會而影響血清質(zhì)量保存/運(yùn)輸:-5°C~-20°C。
看了這些您知道保存胎牛血清的正確的方式嗎,?上??撇┤鹕?/strong>以解決您的問題為己任,不斷完善自身,,提高企業(yè)文化,,以便更好的服務(wù)于科研事業(yè)。
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