在人細胞ELISA試劑盒實驗中,，我們或多或少會遇到樣本濃度接近試劑盒靈敏度,，樣本OD450值低于空白值的現(xiàn)象，尤其是血清和血漿樣本,，這可能是基質(zhì)效應(yīng)的結(jié)果,。那么什么是基質(zhì)效應(yīng)呢？

　　

　　基質(zhì)是指除目標(biāo)分析物之外的樣品部分,。因為基質(zhì)成分會顯著干擾分析過程,，影響分析結(jié)果的準(zhǔn)確性。這些效應(yīng)在業(yè)內(nèi)統(tǒng)稱為矩陣效應(yīng),。這是人細胞ELISA試劑盒研發(fā)和使用中需要避免的雷,。

　　

　　當(dāng)單個樣品或少量樣品的數(shù)值低于空白值時,，可能是實驗操作中出現(xiàn)了問題。這時候就要增加重復(fù),，提高操作技術(shù),。當(dāng)許多樣品低于空白值時，應(yīng)考慮基體效應(yīng)的影響,，建立校正曲線進行修正,。基質(zhì)效應(yīng)的原因很復(fù)雜,，有可能是樣品中的基質(zhì)導(dǎo)致原抗體的結(jié)合能力下降，導(dǎo)致樣品值低于空白值的現(xiàn)象,。因此,，無法計算樣本值，該值可能為負值,。
 

　　

　　雖然原因復(fù)雜,，但有方法可以用來評估基質(zhì)效應(yīng)。

　　

　　1,、線性稀釋,。一般來說，抗原與捕獲抗體和檢測抗體的結(jié)合作用是很強的,。樣品濃度的稀釋不影響它們的結(jié)合,，但引起基質(zhì)效應(yīng)的非特異性結(jié)合力要弱得多。如果樣品被連續(xù)稀釋,，非特異性結(jié)合將導(dǎo)致干燥,。干擾會逐漸減少，測量值會更接近真實值,。當(dāng)沒有基體效應(yīng)時,，無論如何稀釋，測得的值都與真實值一致,。但當(dāng)存在基質(zhì)效應(yīng)時,，稀釋會引起非特異性結(jié)合率的降低，測得的值會相應(yīng)發(fā)生較大變化,。

　　

　　2,、摻入回收率實驗，在該實驗中,，將低,、中、高濃度的分析物摻入到已測量濃度的樣品中,。摻入前后測得的濃度增加與摻入濃度的比率是回收率,，回收率以百分比表示,。回收率在80%-120%之間才能達標(biāo),。

　　

　　那么我們?nèi)绾伪苊馊思毎鸈LISA試劑盒中的基質(zhì)效應(yīng)呢,？

　　

　　通過優(yōu)化產(chǎn)品開發(fā)階段，可以盡可能消除基質(zhì)效應(yīng),。在ELISA試劑盒的研制過程中,，不使用人或動物的血清和血漿作為標(biāo)準(zhǔn)曲線的稀釋劑，只能使用仿制品,。我們定制的緩沖系統(tǒng),，這些優(yōu)化的緩沖系統(tǒng)可以很好地消除基質(zhì)效應(yīng)。在檢測一種分析物時,，如果其他相關(guān)因素或類似的結(jié)構(gòu)因素有非特異性結(jié)合,，也會導(dǎo)致基質(zhì)效應(yīng)。所以我們做了很多交叉反應(yīng),，保證沒有明顯的交叉反應(yīng)和干擾,。而且我們的試劑盒必須通過嚴(yán)格的基質(zhì)效應(yīng)測試，包括線性稀釋和摻入回收率測試,，并在說明書中記錄測試結(jié)果,。