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ELISA試劑盒實驗常見問題與總結(jié)

時間:2023/3/3閱讀:560
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ELISA試劑盒實驗做了很多次,,可是結(jié)果還是有偏差?可能很多同學(xué)都會出現(xiàn)這樣的問題,,那么問題到底出在哪呢,,今天佰利萊生物就來給大家總結(jié)一下,ELISA試劑盒實驗中會經(jīng)常遇見的問題,。

一,、ELISA試劑盒簡介
酶聯(lián)免疫吸附測定是在免疫酶技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種新型的免疫測定技術(shù)。
二,、ELISA試劑盒的應(yīng)用
1.免疫酶染色各種細(xì)胞內(nèi)成份的定位,。
2.研究抗酶抗體的合成。
3.顯現(xiàn)微量的免疫沉淀反應(yīng),。
4.定量檢測體液中抗原或抗體成份,。
三、ELISA試劑盒實驗疑難問題解答
1.非正常的樣本值
①不正確的收集或保存
解決方案:確保正確的底物體積混合,。如果底物是凍干粉,,用相應(yīng)緩沖液重懸*,充分混合并在一定時間內(nèi)使用,。
②不正確的樣本制備
說明書中樣本制備方法已經(jīng)過性能測試驗證,,嚴(yán)格按照說明書推薦進行。確保使用正確的校正稀釋液,。
2.信號強度增長不充分
①底物準(zhǔn)備有誤
解決方案:確保正確的底物體積并混合,。如果底物是凍干粉,,用相應(yīng)緩沖液重懸,充分混合并在一定時間內(nèi)使用,。
②每孔底物添加體積有誤
解決方案:保證移液器正常工作,,必要時進行重新校正。保證移液器吸頭連接緊密,。
③孵育時間或溫度有誤
解決方案:嚴(yán)格按照推薦的孵育時間和溫度進行實驗,,避免在環(huán)境條件變化的位置孵育96孔板(如放在通風(fēng)處或窗臺邊)。
④偶聯(lián)物或底物準(zhǔn)備有誤
解決方案:確?;旌舷嗤w積的偶聯(lián)物和底物,。加入后會立即顯色。底物在使用前應(yīng)避光保存,。
⑤儀器設(shè)置不正確
解決方案:確保酶標(biāo)儀使用了正確的濾光片,,確保按照說明書,正確的配置儀器參數(shù),。
3.邊緣效應(yīng)
①工作臺溫度不均衡
解決方案:避免在環(huán)境條件變化的位置孵育,,如放在通風(fēng)處或窗臺邊。
②體系液體蒸發(fā)
解決方案:保證移液器正常工作,,必要時進行重新校正,。保證移液器吸頭連接緊密。
③疊板孵育時避免疊板,。



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