一,、勻漿介質(zhì)的制備:

一般采用pH 7.4, 0.01mol/L Tris-HCl, 1mmol/L EDTA-2Na, 0.01mol/L蔗糖,0.8%氯化鈉溶液或直接用0.86%的生理鹽水作為勻漿介質(zhì)。

二,、組織勻漿的制備

1,、取組織塊（0.1g～0.2g）最少可到2～5mg在冰冷的生理鹽水中漂洗，除去血液,，濾紙拭干，準(zhǔn)確稱重,，放入5ml的勻漿管中,。

2、按重量(g):體積(ml)=1:9的比例加入9倍體積的勻漿介質(zhì)（pH7.4,， 0.01mol/L Tris-HCl,，1mmol/L EDTA-2Na ,0.01mol/L蔗糖,0.8%的氯化鈉溶液）或者0.86%的生理鹽水于勻漿管中，冰水浴條件下,用眼科小剪盡快剪碎組織塊,。

3,、勻漿的方式有多種：手工勻漿，機器勻漿,，超聲粉碎,。

① 手工勻漿：左手持勻漿管將下端插入盛有冰水混合物的器皿中，右手將搗桿垂直插入套管中，上下轉(zhuǎn)動研磨數(shù)十次（6～8分鐘）,，充分研碎,，制成10%的勻漿液。

② 機器勻漿：用組織搗碎機10000～15000 轉(zhuǎn)/分 上下研磨制成10%組織勻漿,，也可用內(nèi)切式組織勻漿機制備（勻漿時間10秒/次,，間隙30秒，連續(xù)3～5次,，在冰水中進行）,，皮膚、肌肉組織等可延長勻漿時間,。

③ 超聲粉碎：用超聲粉碎機進行粉碎,，可用Soniprep150型超聲波發(fā)生器以振幅14微米超聲處理30秒使細胞破碎，也可用國產(chǎn)超聲波發(fā)生儀,，用400安培,，5秒/次，間隙10秒反復(fù)3～5次,。

        鏡檢觀察:取少量組織勻漿作涂片（直接涂片,、染色均可以），顯微鏡下觀察細胞是否破碎,，若沒有則可延長勻漿時間,。

4、將制備好的10%勻漿液用普通離心機或低溫低速離心機2500轉(zhuǎn)/分左右,離心10～15分鐘,，取上清液進行測定.

三,、樣本保存:

        動物組織樣本暫時不測定，可立即低溫凍存,，溫度越低越好,，中間如不fan復(fù)凍融，-20℃以下可保存三個月,-70℃以下可保存六個月,。

        制備好的勻漿液建議不要凍存,最好當(dāng)天進行測定,如放置時間過長相關(guān)酶活會有所下降,部分指標(biāo)4℃可存放3～5天(如SOD要存放2～3天,MDA可存放3～5,總蛋白測定可存5～7天等)