原代細(xì)胞是指從機體的組織(如人組織、小鼠組織,、大鼠組織和兔組織等)經(jīng)蛋白酶或其它的方法獲得單個細(xì)胞并在體外進行模擬機體培養(yǎng)的細(xì)胞,，稱為原代細(xì)胞。

　　一般認(rèn)為,，培養(yǎng)的原代的第1代細(xì)胞和傳代到第10代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞培養(yǎng),。在人工條件下使其原代細(xì)胞生存、生長、繁殖和傳代,，進行細(xì)胞生命過程,、細(xì)胞癌變、細(xì)胞工程等問題的研究,。

　　那么關(guān)于原代細(xì)胞的傳代培養(yǎng),，我們應(yīng)該怎么做呢?一般有以下兩種方法：

　　一、貼壁細(xì)胞的消化法傳代

　　1,、吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,。

　　2、加入1ml左右消化液(胰蛋白酶或與EDTA混合液)輕輕搖動培養(yǎng)瓶,，使瓶底細(xì)胞都浸入溶液中,。

　　3、消化2-5分鐘后把培養(yǎng)瓶放置在顯微鏡下進行觀察,，發(fā)現(xiàn)原貼壁的細(xì)胞逐漸趨于圓形,，在還未漂起時，棄去消化液,，加入培養(yǎng)液終止消化。

　　4,、用吸管將貼壁的細(xì)胞吹打成懸液,，分別接種到另外兩到三個培養(yǎng)瓶中，置37℃培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng),。第二天觀察貼壁生長情況,。

　　二、懸浮細(xì)胞的傳代

　　1,、直接傳代

　?、?讓懸浮細(xì)胞慢慢沉淀在瓶底后，將上清吸掉1/2-2/3,。

　?、?用吸管吹打形成細(xì)胞懸液后，分別接種到另外兩到三個培養(yǎng)瓶中,，置37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。

　　2、離心法傳代

　?、?將細(xì)胞連同培養(yǎng)液一并轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),，離心800-1000rpm，5分鐘,。

　?、?去除上清，加新的培養(yǎng)液到離心管內(nèi)，用吸管吹打使之形成細(xì)胞懸液,。

　?、?將細(xì)胞懸液分別接種到另外兩到三個培養(yǎng)瓶中，置37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。