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一,、產(chǎn)品簡介

CHO細胞專用轉染試劑盒——PolyTool™ CHO-Fit Transfection Reagent Kit，是一款高效經(jīng)濟的核酸轉染試劑,，專門用于在CHO懸浮細胞進行重 組蛋白生產(chǎn)的試劑盒,，包含轉染試劑、稀釋液,、無血清培養(yǎng)基,、補料、增強劑等組分,，具有操作簡單,、價格便宜、 蛋白產(chǎn)量高等優(yōu)點,。

PolyTool™ CHO-Fit Transfection Reagent Kit適用范圍：CHO細胞的高密度無血清懸浮培養(yǎng),、DNA 瞬時轉染及蛋白表達。

二,、實驗操作流程

1.細胞接種（以25mL體系為例）：

根據(jù)細胞狀態(tài),，選擇合適的接種密度，建議接種密度為2.5~3×10⁶ cells/mL,，待第二天細胞密度達到6×10⁶ cells/mL左右,，活性大于95%時進行轉染。

2.瞬時轉染：

建議質粒（μg）與試劑（μL）參考配比區(qū)間為1:2~1:4之間,。具體步驟如圖1所示（以1:3為例）：

（1）使用本樣品前渦旋混勻5秒,，使用1.25 mL PolyTool™ CHO Medium稀釋75 μL的轉染試劑，并吹打均勻,；

（2）使用1.25 mL PolyTool™ CHO Medium稀釋25 μg質粒,，并吹打混勻；

（3）將(1)和(2)所述溶液混合均勻,；

（4）將(3)所述混合溶液室溫靜置孵育10~15 min,；

（5）將(4)中的復合物溶液加入25 mL的細胞培養(yǎng)體系中，放回搖床中,，在37 ℃,、震蕩速度120 rpm下繼續(xù)培養(yǎng),。

3.產(chǎn)物表達與檢測：

（1）轉染24小時、72小時,、120小時,、168小時后加入3%（0.75 mL/25 mL）PolyTool™ CHO S1補料、0.3%（75 μL/25 mL）PolyTool™ CHO S2補料,。

若想獲得高表達效果,，24 小時添加完補料后,，將細胞轉移至32℃搖床培養(yǎng)箱中進行低溫表達（葡萄糖控制在 4~8 g/L）,。

（2）轉染后第 6~8 天測定產(chǎn)物表達量。大多數(shù)蛋白的合成在轉染后第7天左右可達到最高值,，客戶可根據(jù)細胞狀態(tài)及表達量選擇適宜的收獲時間,。

 圖1 細胞轉染示意圖

CHO細胞專用轉染試劑盒PolyTool™ CHO-Fit Transfection Reagent Kit代理——天津益元利康生物科技有限公司，成立于2018年,，坐落于天津經(jīng)濟技術開發(fā)區(qū),。公司產(chǎn)品線涉及細胞與基因治療、免疫學,、分子生物學,、細胞生物學等多個方向，專注于生命科學試劑,、耗材,、細胞、儀器等產(chǎn)品銷售,，經(jīng)營的品牌主要有：ThermoFisher,、Sigma、Qiagen,、EZBioscience,、ZYMO Research、MedKoo,、Abcam等等,。我們提供質優(yōu)價美的產(chǎn)品、及時到位的服務,，努力成長為生命科學和生物技術企業(yè)的優(yōu)質供應商,。