Transwell細胞遷移實驗,，也稱為Transwell遷移或侵襲測定實驗,，是一種用于細胞生物學和分子生物學的實驗室技術，用于研究細胞通過多孔膜的運動,。前面已經(jīng)講過實驗步驟,，那實驗過程中需要注意些什么呢？
注意事項一
基質膠在室溫下容易凝固,，鋪膠過程全程需要在冰上操作,。
注意事項二
基質膠濃度也是影響細胞遷移和侵襲的因素之一，所以基質膠的濃度和稀釋比例需根據(jù)供應商提供的信息和實驗具體情況調整,，必要時可設置預實驗摸索最佳濃度和稀釋比例,。一般常用濃度為1mg/mL,。
注意事項三
鋪膠時，盡量垂直小室底部在小室底部中間加入,，可避免氣泡的產(chǎn)生,。
注意事項四
吸出小室內(nèi)未結合的基質膠時需確保移液管的尖頭不會刮傷凝膠層表面。
注意事項五
不同細胞的遷移和侵襲能力不同,，可設置一系列細胞密度梯度摸索合適的細胞接種密度,。
注意事項六
小室的放置過程經(jīng)常有氣泡產(chǎn)生，一旦產(chǎn)生氣泡,，下層培養(yǎng)液的趨化作用就減弱甚至消失,，因此需特別留心。一旦出現(xiàn)氣泡,，需將小室提起或用槍頭去除,，去除氣泡后重新放置。
注意事項七
接種細胞1-2小時后,，可對培養(yǎng)板進行檢查,，確保沒有大氣泡產(chǎn)生。但有時會觀察到有極小的汽包產(chǎn)生,，但并不影響細胞遷移和侵襲,，也可輕輕敲擊孔板去除。
注意事項八
用PBS清洗小室時,，需避物理觸碰小室底部,。可以準備幾個無菌燒杯或培養(yǎng)皿,，倒入適量PBS,，依次涮洗，可提高效率,。
注意事項九
拍照前需適當晾干小室,，水分會影響鏡下視野。
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