一、瓊脂糖凝膠
瓊脂糖是一種從紅藻中提取的天然線性聚合物,,其基本結(jié)構(gòu)是由D-和L-半乳糖殘基通過α(1→3)和β(1→4)糖苷鍵交替連接而成的長鏈,。瓊脂糖在水中加熱溶解后,冷卻時能形成半固體狀的凝膠,。制成的小顆粒用于凝膠過濾。適于用sephadex不能分級分離的大分子的凝膠過濾,,若使用5%以下濃度的凝膠,,也能夠分級分離細胞顆粒、病毒等,。利用其吸附性小的特點,,有時用它代替瓊脂、以作為免疫電泳或凝膠內(nèi)沉降反應(yīng)的支持物,。瓊脂糖凝膠具有多孔性,,其孔徑大小與DNA分子的雙螺旋直徑相當,這使得它成為理想的分離介質(zhì),。此外,,瓊脂糖凝膠具有親水性,且?guī)缀醪淮嬖趲щ娀鶊F,,因此對生物大分子極少引起變性和吸附,,是理想的惰性載體。
二,、電泳原理:
1.電荷效應(yīng):
DNA分子在堿性條件下(pH>7)會電離,,帶負電荷。當DNA樣品置于電場中時,,會受到電場力的作用,,向正極方向移動。DNA分子的遷移速率與其所帶的電荷量成正比,,而電荷量又與DNA片段的長度成正比,。因此,在相同電場條件下,,較長的DNA片段遷移速率較慢,,而較短的DNA片段遷移速率較快。
2.分子篩效應(yīng):
分子篩效應(yīng)的原理基于分子篩的多孔結(jié)構(gòu),。分子篩晶體具有蜂窩狀的結(jié)構(gòu),,晶體內(nèi)的晶穴和孔道相互溝通,并且孔徑大小均勻且固定(分子篩空腔直徑一般在3—15埃之間),,只有那些直徑比較小的分子才能通過沸石孔道被分子篩吸附,,而構(gòu)型龐大的分子由于不能進入沸石孔道,則不被分子篩吸附。這種根據(jù)分子大小和形狀的不同選擇吸附的現(xiàn)象,,就是分子篩效應(yīng),。
瓊脂糖凝膠由瓊脂糖分子交聯(lián)形成的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),其孔徑大小與瓊脂糖濃度成反比,。當DNA分子通過凝膠時,,會受到凝膠孔徑的阻礙。較小的DNA片段可以通過凝膠孔隙,,而較大的DNA片段則會被阻擋,,導(dǎo)致遷移速率降低。這種分子篩效應(yīng)使得瓊脂糖凝膠電泳能夠有效地分離不同大小的DNA片段,。
三,、瓊脂糖凝膠推薦
貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
310101-1G | 1G;5G;250G;500G | |
340201-5ML | 5mL;50mL;1L | |
310201-1G | 1G;10G;100G |
立即詢價
您提交后,,專屬客服將第一時間為您服務(wù)