PEI聚乙烯亞胺線性轉(zhuǎn)染試劑作為一種陽離子聚合物非病毒基因載體,,在線性轉(zhuǎn)染試劑的領(lǐng)域中扮演著比較重要的角色。其特殊的化學(xué)結(jié)構(gòu)使其成為科研工作中不可少的材料之一,。
PEI是由單體(-CH2-CH2-NH-)構(gòu)成,,具有伯胺﹑仲胺和叔胺基團(tuán)的水溶性聚合物。其結(jié)構(gòu)中,,每3個(gè)原子就有1個(gè)氮原子,,形成了豐富的胺基,這使得聚合物網(wǎng)絡(luò)在任何pH下都能充當(dāng)有效的質(zhì)子海綿體,。這一特性使得PEI具有較強(qiáng)的結(jié)合DNA的能力,,以及黏附細(xì)胞并作為基因轉(zhuǎn)導(dǎo)載體的能力。
PEI能夠?qū)NA縮合成帶正電荷的微粒,,這些微??梢责ず系綆в胸?fù)電荷的細(xì)胞表面殘基上,并通過胞吞作用進(jìn)入細(xì)胞,。這一過程是PEI進(jìn)行基因轉(zhuǎn)染的基礎(chǔ),,也是其得以廣泛應(yīng)用的關(guān)鍵所在。在生理pH下,,PEI的氨基團(tuán)近半數(shù)被質(zhì)子化,,而另外一半則處于未質(zhì)子化狀態(tài)。這種結(jié)構(gòu)特性不僅使PEI具有較好的水溶性,,還意味著其在不同pH條件下都能有效結(jié)合核酸,,并實(shí)現(xiàn)高效的轉(zhuǎn)染效率,。
PEI25K由于含有4-11%的殘留丙酰基,,這可能阻礙聚合物主鏈與DNA的有效結(jié)合,,因此批間轉(zhuǎn)染效率可能會(huì)有比較大的差異。為了確保實(shí)驗(yàn)的一致性和可重復(fù)性,,建議當(dāng)采購PEI25K時(shí),,一個(gè)批次可以多購買一些存儲(chǔ)。值得注意的是,,盡管有效期標(biāo)注只有18個(gè)月左右,,但在室溫干燥避光的條件下,PEI25K的穩(wěn)定性實(shí)際上可以保持10年以上,。
PEI聚乙烯亞胺線性轉(zhuǎn)染試劑具有細(xì)胞毒性低,,轉(zhuǎn)染效率高的特點(diǎn)。特別是在HEK293和CHO等細(xì)胞中,,基因表達(dá)效率較高,。線性PEI轉(zhuǎn)染試劑廣泛適用于多種細(xì)胞系,包括但不限于HEK-293,、HEK293T,、CHO-K1、COS-1,、COS-7,、NIH/3T3,、Sf9,、HepG2和Hela細(xì)胞等。
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