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金黃色葡萄球菌腸毒素B（Staphylococcal enterotoxin B, SEB）由于具有超抗原性，且在SEs系列毒素中毒性最qiang,、最為耐熱,，對腸胃道蛋白酶最有抵抗性,，在食品加工過程中極難去除,，故對人類健康具有嚴(yán)重的威脅,。

《金黃色葡萄球菌腸毒素B單克隆抗體的研制及雙功能免疫層析試紙條產(chǎn)品開發(fā)》一文中,，就首先以SEB為免疫原，通過免疫Balb/C小鼠,，測定小鼠血清效價,、細(xì) 胞融合,、篩選陽性雜交瘤細(xì)胞,、亞克隆以及抗體配對等一系列操作,，最終獲得兩株能穩(wěn)定分泌抗SEB單克隆抗體的細(xì)胞株（分別命名為15H11和5D6）,，且兩株抗體能夠與SEB形成穩(wěn)定的“三明治"夾心結(jié)構(gòu),；兩株抗SEB單克隆抗體均為IgG1 亞型,，親和常數(shù)分別為2.08 × 109 M以及1.81 × 109 M,；且與其它四種常見腸毒素 SEA,，SEC,，SED以及SEE均無交叉反應(yīng),。 其次,，以油氨修飾的金納米粒子（AuNPs@OA）、紅色聚集誘導(dǎo)發(fā)射熒光染料（AIEgens）為比色,、熒光功能材料,，1-十八烯馬來酸酐聚合物（PMAO）為填充劑，通過微乳液法合成了具有Janus結(jié)構(gòu)的比色-熒光雙功能納米微球（JAIE@Au NBs）。由于AuNPs@OA和AIEgens在聚合物PMAO中溶解度存在極大差異，在氯仿蒸發(fā)過程中AuNPs@OA和AIEgens發(fā)生明顯相分離，導(dǎo)致AIEgens自動聚集成核,，PMAO形成殼層,，而AuNPs@OA分布在PMAO層一側(cè),，因而形成了具有Janus結(jié)構(gòu)的比色-熒光雙功能J-AIE@Au NBs,。由于AuNPs與AIEgens存在物理間隔，且AuNPs在AIEgens一側(cè)，因此有效地消除了兩者之間的能量轉(zhuǎn)移,，且降低了熒光內(nèi)濾效應(yīng),，從而極大地保留了AIEgens的熒光信號。隨后將單克隆抗體15H11標(biāo)記J-AIE@Au NBs獲得免疫探針,，在NC膜上噴涂抗體5D6制備獲得比色定性以及熒光定量檢測SEB的免疫層析試紙條J-AIE@Au-ICA。在最佳條件下,，該試紙條檢測全脂乳中SEB的定量線性范圍為0.39 ng/mL ~ 400 ng/mL,，最di檢測限（Limit of detection, LOD）為0.09 ng/mL，靈敏度較傳統(tǒng)ELISA法提高了近70 倍,；同時,，采用比色法裸眼定性檢測SEB的最di檢測限為1.56 ng/mL,。該試紙條 檢測全脂乳中SEB的批內(nèi),、批間加標(biāo)回收率為86.0 2%至115 %,，變異系數(shù)介于 4.97 %至12.86 %之間,，且與其它4種常見腸毒素?zé)o交叉反應(yīng),。此外,，該試紙條檢 測生牛乳以及脫脂乳中SEB的LOD分別為0.19 ng/mL和0.19 ng/mL。隨后,，將試紙 條分別用于檢測人工污染SEB的全脂乳,、生牛乳和脫脂乳樣品，結(jié)果顯示回收率 介于91.04 %至118.82 %之間,，變異系數(shù)介于3.91 %至12.86 %之間,。以上結(jié)果表明,，本研究建立的比色、熒光雙功能試紙條能夠?qū)崿F(xiàn)對多種牛奶中的SEB快速且準(zhǔn)確的定量分析,。

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