用于ELISA實驗的樣本有多種類型,，包括血清、血漿,、細胞培養(yǎng)上清,、尿液以及組織勻漿等。不同樣本類型的預處理方法存在差異,。合適的樣本預處理,，是確保ELISA實驗準確性的第一步。下面讓我們一起來看看ELISA實驗三類樣本的處理方法吧,！
一,、液體樣本
1. 血清
血清是ELISA實驗常用的樣本,，其預處理也十分簡單。使用無熱原無內(nèi)毒素的試管或離心管采集血液樣本,，將試管或離心管在室內(nèi)溫度下放置自然凝固(視室溫環(huán)境10分鐘到2小時不等)或4℃過夜,，分離出血清，(建議傾斜試管或離心管以擴大液面的橫截面,，使血清能更大程度的分離出來,，)，2-8℃條件離心5分鐘左右(5000-6000轉/分鐘),，仔細收集上清,，立即進行測定，建議在-20℃或-80℃下將收集的血清分裝保存,，避免反復凍融,，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應再次離心,。
2. 血漿
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA,、肝素鈉、枸櫞酸納或檸檬酸鈉作為抗凝劑,，使用含抗凝劑的采血管或離心管采集血液樣本,，采集后30分鐘內(nèi)，混合10-20分鐘后,，2-8℃條件離心5分鐘左右(5000-6000轉/分鐘),，仔細收集上清液(血漿)，建議在-20℃或-80℃下將收集的血清分裝保存,，避免反復凍融,。樣本應避免溶血或高血脂。保存過程中如有沉淀形成,，使用前應該再次離心,。
二、固體樣本
1. 組織標本
切割標本后,，稱取1g組織,，加入9ml的pH7.2-7.4左右的PBS，用手工或勻漿器將標本勻漿充分,。2-8℃條件離心5分鐘左右(5000-6000轉/分鐘),，仔細收集上清。分裝一份待檢測,，其余冷凍備用,，保存過程中如有沉淀形成，使用前應再次離心,。對于植物組織,，不好勻漿的話,，就在液氮中充分研磨。
2. 細胞內(nèi)蛋白樣本
許多待測蛋白不是分泌蛋白,，而是存在于細胞內(nèi)的蛋白,，這個時候，要先收集細胞,，洗滌干凈,，再破碎細胞，離心取上清,。
三,、植物樣本
1. 標本的精采集及保存
取0.1g(誤差±3%以內(nèi))新鮮植物組織樣本，在液氮中充分研磨,；加入1ml的提取液(80%甲醇), 置于-20℃過夜,；于4℃，8000rpm,，離心1小時,，取上清。
上清液過C-18固相萃取柱,。具體步驟是：80%甲醇(1ml)平衡柱→上樣→收集樣品→移開樣品后用100%甲醇(5ml)洗柱→100%(5ml)洗柱→100%甲醇(5ml)洗柱→循環(huán),。過柱后的樣本真空干燥或氮氣吹干，保存?zhèn)溆谩?br />
上樣前加入pH7.4 PBS緩沖液(1ml定容),?；靹蚝笫覝胤胖?0分鐘，然后4℃離心(8000rpm,，15分鐘)，取上清并暫時保存于4℃待用,。
2. 植物標本中相關酶或蛋白的測定(粗提取)
新鮮植物組織請在液氮中充分研磨,；加入樣品體積9倍的提取液(pH 7.4 PBS緩沖液)，請于4℃,，8000rpm,，離心30分鐘，取上清并暫時保存于4℃待用,。
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