細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)對(duì)于生產(chǎn)病毒性疫苗和其他生物技術(shù)產(chǎn)品至關(guān)重要,。細(xì)胞傳代是細(xì)胞培養(yǎng)bi不可少的過程,,對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代時(shí)首先需進(jìn)行細(xì)胞分離,。胰蛋白酶(胰酶)是常用的消化酶,,可使細(xì)胞間的蛋白質(zhì)水解從而使細(xì)胞離散,。胰酶可在胰腺中大量獲得,且易提純,,因此在各種細(xì)胞培養(yǎng)過程中得到廣泛應(yīng)用,。那么你知道中科百抗Neptry胰酶細(xì)胞消化液的應(yīng)用與注意事項(xiàng)有什么嗎?讓我們一起來看看吧,!
中科百抗NeptryTM消化液是一種胰蛋白酶類似物(Trypsin Like Enzyme),,是一種通過生物工程制備的非動(dòng)物源性重組蛋白酶,與胰蛋白酶有相似的解離動(dòng)力學(xué),,穩(wěn)定性更高,,純度更好,消化更溫和,,細(xì)胞毒性更低,。目前主要應(yīng)用于細(xì)胞培養(yǎng)中,可以在賴氨酸和精氨酸的C末端切割肽鍵,,可以替代豬或牛胰蛋白酶(Trypsin)對(duì)貼壁細(xì)胞的消化解離,。生物制藥中,GMP級(jí)別的NeptryTM能夠?yàn)橐呙缟a(chǎn),、病毒載體生產(chǎn)提供高質(zhì)量和高性價(jià)比的貼壁細(xì)胞消化解決方案,。
NeptryTM消化液與胰蛋白酶具有類似的功能,由大腸桿菌(E.coli)重組表達(dá),,GMP條件生產(chǎn),,在性能和儲(chǔ)存上可wan全替代傳統(tǒng)動(dòng)物源胰酶,讓細(xì)胞消化更加高效便捷,。產(chǎn)品主要應(yīng)用方向:
1.用于組織塊的消化解離和原代細(xì)胞的獲?。?/p>
2.用于貼壁細(xì)胞的傳代消化和收獲,;
3.用于微載體方法培養(yǎng)的細(xì)胞消化和收獲;
4.用于疫苗生產(chǎn)過程中一些貼壁宿主細(xì)胞的消化,,低血清或無血清的環(huán)境下,弱貼壁細(xì)胞及干細(xì)胞在傳代過程中的消化,。
使用Neptry消化液注意事項(xiàng):
1.在使用過程中注意避免消化液被細(xì)菌污染,;
2.消化的時(shí)間不宜過長(zhǎng),否則細(xì)胞鋪板后生長(zhǎng)狀況會(huì)較差,,做流式時(shí)的CD Marker也會(huì)下降,;
3.消化液進(jìn)行分裝時(shí)需分裝成多瓶,并遵守3次左右用完和只裝2/3體積的原則,。,;
4.在低血清或無血清的環(huán)境下,弱貼壁細(xì)胞及干細(xì)胞在傳代過程中的消化效果主要取決于pH值,、溫度,、消化液濃度,、組織塊大小和硬度。
5.酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑,,中性時(shí)為紅色,,酸性時(shí)為黃色,堿性時(shí)為紫色,。研究表明酚紅可以模擬固醇類激素的作用,為避免固醇類反應(yīng),,培養(yǎng)細(xì)胞特別是哺乳類細(xì)胞時(shí),,需用不加酚紅的培養(yǎng)基。
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