細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一,。利用凍存技術(shù)將細(xì)胞置于-196℃液氮中低溫保存，可以使細(xì)胞暫時(shí)脫離生長狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來,，這樣在需要的時(shí)候再復(fù)蘇細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn),。而且適度地保存一定量的細(xì)胞，可以防止因正在培養(yǎng)的細(xì)胞被污染或其他意外事件而使細(xì)胞丟種,，起到了細(xì)胞保種的作用,。
BAMBANKER是一種含DMSO的無血清細(xì)胞凍存液，無不明動(dòng)物源成分,，高質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)為實(shí)驗(yàn)效果帶來保證,。不需要進(jìn)行程序降溫，可在-80℃長期保存細(xì)胞（腫瘤細(xì)胞和常規(guī)細(xì)胞）,。那么你知道BAMBANKER® 無血清細(xì)胞凍存液凍存細(xì)胞的方法嗎,？讓我們一來看看吧,！
一、凍存操作步驟
①從恒溫箱中取出培養(yǎng)中處于對數(shù)增殖期的細(xì)胞,。
凍存對數(shù)增殖期的細(xì)胞,，是可以確保細(xì)胞良好生存率中最重要的一點(diǎn)。
②使用部分細(xì)胞用臺盼藍(lán)染色并計(jì)數(shù)細(xì)胞數(shù)量,。
③將培養(yǎng)液移至離心管中,，在規(guī)定條件下進(jìn)行離心。
④去除上清液后,，將雜質(zhì)顆粒通過旋渦操作進(jìn)行懸浮,。
⑤每個(gè)凍存容器中細(xì)胞數(shù)要保持規(guī)定濃度，然后再添加凍存液,。（每 1mL 凍存液可容納 5×105-1×107 個(gè)細(xì)胞）
之后的操作步驟盡可能快速完成,。另外，凍存液從冷藏柜取出后,，盡快進(jìn)行保存處理
⑥無需預(yù)冷細(xì)胞懸浮液,，直接置于-80℃下保存。
若儲存在冷凍處理容器 bicell中,，效果更佳,。
⑦保存液氮時(shí)，先在-80℃保存 12 小時(shí)（超過一晚）,，待狀態(tài)穩(wěn)定后在移至液氮中保存,。
轉(zhuǎn)移細(xì)胞時(shí)請盡快完成操作。
二,、解凍操作步驟
①在 37℃恒溫箱（或者水浴鍋）等設(shè)備中解凍細(xì)胞,，確認(rèn)細(xì)胞液wan全融解。
此操作需迅速進(jìn)行,。因?yàn)榧?xì)胞在解凍過程過極易受到損壞,。
②將細(xì)胞液注入到 10mL 的清洗液（培養(yǎng)液）中，混合wan全后在規(guī)定條件下進(jìn)行離心
（比如：300～400×ｇ,；半徑 21cm 轉(zhuǎn)子 1200rpm）
③去除上清液后,，將雜質(zhì)顆粒通過旋渦操作進(jìn)行懸浮。
④加入培養(yǎng)液后混合wan全后,，將其中一部分細(xì)胞用臺盼藍(lán)染色并計(jì)數(shù)細(xì)胞數(shù)量,。
⑤將培養(yǎng)液轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)容器中，恒溫箱內(nèi)靜置培養(yǎng),。
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