你知道競(jìng)爭(zhēng)法ELISA的原理是什么嗎,？讓我們一起來(lái)看看吧,！
競(jìng)爭(zhēng)法ELISA（也稱(chēng)抑制或封閉法ELISA）通過(guò)定量某種樣品分析物對(duì)預(yù)計(jì)信號(hào)的干擾，來(lái)測(cè)定該分析物在樣品中的含量,，可通過(guò)以下方式進(jìn)行：微孔板用一種分析物或一種對(duì)靶標(biāo)分析物具有特異性的抗體包被（即直接法和間接法）,，再添加一種有部分某種檢測(cè)的靶標(biāo)分析物，以競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合抗體上的位點(diǎn),。信號(hào)與分析物含量呈負(fù)相關(guān),，因此，如果靶標(biāo)分析物的濃度較分析物高,，靶標(biāo)分析物競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合有xian量的標(biāo)記抗體,，參考信號(hào)將會(huì)較靶標(biāo)分析物的濃度較低的情況增強(qiáng)。
競(jìng)爭(zhēng)法的理論基礎(chǔ)是xian量抗體,，只有在xian量抗體基礎(chǔ)上,，兩種抗原才會(huì)形成競(jìng)爭(zhēng)關(guān)系。該方法一般用來(lái)檢測(cè)具有較少表位的小分子物質(zhì),。
競(jìng)爭(zhēng)法ELISA是一種較少用到的ELISA檢測(cè)機(jī)制,，一般用于檢測(cè)小分子抗原，其操作步驟為：
1. 將具有專(zhuān)一性之抗體固著于塑膠孔盤(pán)上,，完成后洗去多余抗體
2. 加入待測(cè)檢體,，使檢體中的待測(cè)抗原與塑膠孔盤(pán)上的抗體進(jìn)行專(zhuān)一性鍵結(jié)
3. 加入帶有酵素之抗原，此抗原也可與塑膠孔盤(pán)上的抗體進(jìn)行專(zhuān)一性鍵結(jié),，由于塑膠孔盤(pán)上固著的抗體數(shù)量有限,，因此當(dāng)檢體中抗原的量越多，則帶有酵素之抗原可鍵結(jié)的固著抗體就越少,，亦即,，兩種抗原皆競(jìng)相與塑膠孔盤(pán)上抗體鍵結(jié)，即所謂競(jìng)爭(zhēng)法之由來(lái),。
4. 洗去檢體與帶有酵素之抗原,，加入酵素底物使酵素呈色,，當(dāng)檢體中抗原量越多，代表塑膠孔盤(pán)內(nèi)留下之帶有酵素的抗原越少,，顯色也就越淺,。
5. 當(dāng)需要偵測(cè)無(wú)法獲得兩種以上單一性抗體的抗原，或是不易得到足夠的純化抗體以固著于孔盤(pán)上時(shí),，一般會(huì)考慮使用競(jìng)爭(zhēng)法ELISA,。
當(dāng)需要偵測(cè)無(wú)法獲得兩種以上單一性抗體的抗原，或是不易得到足夠的純化抗體以固著于孔盤(pán)上時(shí),，一般會(huì)考慮使用競(jìng)爭(zhēng)法ELISA,。
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