化學法轉染技術已廣泛應用于細胞的穩(wěn)定或瞬時轉染,那么你知道不同化學轉染方法的優(yōu)點與缺點是什么嗎,?讓我們一起來看看吧,!
一、陽離子脂質體
優(yōu)點:
1.操作快速簡單,。
2.結果可重復,。
3.轉染效率高。
4.可轉染DNA,,RNA和蛋白質,。
5.適用于生產瞬時和穩(wěn)定的蛋白質。
6.可用于體內轉染,。
缺點:
1.需進行條件優(yōu)化(一些細胞系對陽離子脂質體較敏感),。
2.有些細胞系不容易轉染。
3.血清的存在干擾復合物的形成,,導致低轉染效率,。
4.培養(yǎng)基中血清的缺失會增加細胞毒性。
二,、磷酸鈣共沉淀
優(yōu)點:
1.便宜且容易獲得,。
2.適用于生產瞬時和穩(wěn)定的蛋白質。
3.轉染效率高(不限制細胞系),。
缺點:
1.需要仔細制備試劑 – CaPO4溶液對pH,,溫度和緩沖鹽濃度的變化敏感。2.可重復性較差,。
3.有細胞毒性,,尤其對原代細胞。
4.不能采用RPMI培養(yǎng)基,,由于其含高濃度的磷酸鹽,。
5.不適用于動物體內轉染,。
三、葡聚糖:
優(yōu)點:
1.操作簡單,。
2.結果可重復,。
3.便宜。
缺點:
1.對某些細胞有化學毒性,。
2.只限于瞬時轉染,。
3.轉染效率低,尤其在原代細胞中,。
四,、其他陽離子聚合物
優(yōu)點:
1.在血清中穩(wěn)定,對溫度不敏感,。
2.高轉染效率(限制細胞系)。
3.結果可重復,。
缺點:
1.對某些細胞有毒性,。
2.不能生物降解(樹枝狀大分子)。
3.只限于瞬時轉染,。
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