免疫組化(Immunohistochemistry,,IHC)是基于抗原抗體特異性結(jié)合的原理,通過化學反應使標記抗體的顯色來對組織內(nèi)抗原進行定位,、定性,、定量的一項技術(shù)。那么你知道免疫組化實驗的分類與應用嗎,?讓我們一起來看看吧,!
一、分類
根據(jù)抗體標記物的不同一般分為免疫酶標法,、免疫熒光法,、親和組織化學法、免疫鐵蛋白法,、免疫金法,、放射免疫自影法。下面介紹兩種較為常用的兩種技術(shù):
(1)免疫熒光法
免疫熒光法是最早建立的免疫組織學技術(shù),。將已知抗體標上熒光素,,以此作為探針,檢查細胞或組織內(nèi)的相應抗原,。當抗原抗體復合物中的熒光素受激發(fā)光的照射后會發(fā)出一定波長的熒光,,從而對組織中的抗原進行定位或定量。
(2)免疫酶標法
免疫酶標法是繼免疫熒光之后發(fā)展的應用較為廣泛的免疫組化技術(shù),。先以酶標記的抗體作用于組織或細胞,,然后加入酶的底物,生成有色的不溶性物質(zhì)或具有一定電子密度的顆粒,,通過光鏡或電鏡,,對其進行定位,從而對細胞內(nèi)抗原進行定位或定性研究的一種方法,。
二,、應用
IHC的原理是通過化學反應使標記抗體的顯色劑顯色來確定組織細胞內(nèi)抗原,對其進行定位,、定性及定量的研究,。人體內(nèi)很多器官和組織內(nèi)的組成細胞,由于起源一致,,在形態(tài)結(jié)構(gòu)上非常相似,,很多時候是很難靠形態(tài)來區(qū)分,。在過去沒有免疫組化的情況下,識別有很強的主觀性,,錯誤難以避免。免疫組化就像細胞的“血型"鑒定,,靠它可以明確組織來源,。由于免疫組化具有特異性強、靈敏度高,、定位準確等特點,,且能將形態(tài)研究與功能研究有機結(jié)合在一起,所以這門新技術(shù)已被廣泛應用于生物學和醫(yī)學研究的許多領(lǐng)域,。免疫組化在病理學診斷中的應用主要包括:
(1)確定細胞類型
(2)辨認細胞產(chǎn)物
(3)了解分化程度
(4)鑒定病變性質(zhì)
(5)探討腫瘤起源或分化表型
(6)確定腫瘤分期等
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