Q：jetPRIME®是哪種類型的化合物？
A：jetPRIME®是由Polyplus-transfection®公司合成的zhuan利產(chǎn)品,，一種新型的基于陽離子聚合物的分子,。
Q：使用jetPRIME®進行轉(zhuǎn)染時，質(zhì)粒是如何導(dǎo)入的,？
A：jetPRIME®和DNA形成帶正電荷的復(fù)合物。這些復(fù)合物通過內(nèi)吞作用進入細胞,。隨后經(jīng)質(zhì)子海綿作用,，內(nèi)涵體在細胞質(zhì)中釋放DNA。當(dāng)有絲分裂過程中核膜消失時,，質(zhì)粒大多到達細胞核,。
Q：我的細胞比較脆弱，無血清時不能生長,。我可以嘗試在有血清的條件下進行轉(zhuǎn)染嗎,？
A：與許多其他轉(zhuǎn)染試劑相反，在有血清的環(huán)境下,，jetPRIME®的效率更高,。因此，轉(zhuǎn)染復(fù)合物可以直接加到含血清培養(yǎng)基的細胞中,。
無血清培養(yǎng)基：Opti-MEM培養(yǎng)基（thermo）
Lipo2000,轉(zhuǎn)染時需要更換培養(yǎng)為Opti-MEM;需要用Opti-MEM復(fù)合物,轉(zhuǎn)染6小時后需要換液,。對細胞毒性大。
Lipo3000, 轉(zhuǎn)染時需要更換培養(yǎng)為Opti-MEM;需要用Opti-MEM復(fù)合物,轉(zhuǎn)染6小時后無需換液,。跟lipo2000相比,，毒性小。
抗生素問題：
jetPRIME®的轉(zhuǎn)染效率不受抗生素的影響,。jetPRIME的常規(guī)批次質(zhì)檢都是在含血清和抗生素的培養(yǎng)基中進行的,。
細胞密度問題：
細胞密度和傳代次數(shù)將影響轉(zhuǎn)染效率。推薦細胞融合度在60%-80%,。對于使用jetPRIME的轉(zhuǎn)染優(yōu)化條件,，請參考jetPRIME®轉(zhuǎn)染說明書中的Table 1，根據(jù)不同培養(yǎng)板推薦的細胞數(shù),。此外,，如果細胞已經(jīng)培養(yǎng)很長時間（超過20代），建議從液氮中取新的細胞重新培養(yǎng),。
比值問題：
Q：DNA/jetPRIME®的比值是什么意思,？
A：該比值指的是每微克（ug）DNA相對應(yīng)的jetPRIME微升數(shù)（uL）。例如,，DNA/jetPRIME®比值為1：2意思是每ug DNA加2uLjetPRIME.
優(yōu)化的問題：
優(yōu)化的第一步是將DNA的量增加1.5倍,。推薦增加DNA/jetPRIME®比值(每ug的DNA，2-3uLjetPRIME®), 另一種方法是緩慢離心培養(yǎng)板（5min，210g）
擴大的問題：
一般來說,，DNA的量應(yīng)該和總細胞數(shù)成比例,。參考jetPRIMEprotocol中的推薦，根據(jù)不同規(guī)格的培養(yǎng)皿,，所需要的DNA和jetPRIME的量（Table 2）
細胞特異性問題：
Q：對于所有細胞可以使用同樣的條件嗎,？
A：已優(yōu)化的操作步驟可用于多種細胞，例如A549, MCF7,U2OS, NIH-3T3, B16-F10, Caco-2等,。更多細胞的優(yōu)化條件,，請咨詢客服!
HEK-293和HeLa細胞問題：
Q：HEK-293和HeLa細胞：是否可以提供使用jetPRIME轉(zhuǎn)染HEK-293和HeLa細胞的具體建議？
A：jetPRIME對于DNA轉(zhuǎn)染HEK-293 和HeLa細胞都是非常高效的,。因此,，推薦減少DNA的量（例如6孔板，每孔1ug-0.5ug）,，使用1：2的DNA和jetPRIME比例,。
懸浮細胞問題：
Q：jetPRIME®推薦用于懸浮細胞的DNA轉(zhuǎn)染嗎？
A：懸浮細胞,，例如T和B淋巴細胞是眾suo周知的難轉(zhuǎn)染DNA細胞,，無論哪種化學(xué)方法的試劑都很難有較好的轉(zhuǎn)染效率。因此,，通常推薦電轉(zhuǎn)或者病毒轉(zhuǎn)染核酸到懸浮細胞,。
植物細胞問題：
Q：jetPRIME®是否測試過可以用于植物細胞的轉(zhuǎn)染？
A：植物細胞富含纖維素的膜阻止了jetPRIME/DNA復(fù)合物進入細胞,。甚至在脫去纖維素的原生質(zhì)體階段,，復(fù)合物也無法穿透進入細胞質(zhì)。
HUVEC(人臍靜脈內(nèi)皮細胞)問題：
Q：jetPRIME®對HUVEC的DNA轉(zhuǎn)染是否有效,？
A：對于HUVEC細胞,，推薦使用jetPEI®-HUVEC，專為該細胞的DNA轉(zhuǎn)染設(shè)計的特異性轉(zhuǎn)染試劑,?？梢杂?/span>jetOPTIMUS替代。
原代神經(jīng)元問題：
Q：對于原代培養(yǎng)的神經(jīng)元,，可以使用jetPRIME®嗎,？
A：神經(jīng)元很難轉(zhuǎn)染，主要是因為其在培養(yǎng)的過程中不分裂,。然而,，jetPEI®已被成功用于神經(jīng)元的體外轉(zhuǎn)染。
巨噬細胞問題：
Q：對于DNA轉(zhuǎn)染巨噬細胞,，jetPRIME的轉(zhuǎn)染效率如何?
A：jetPRIME已成功用于Raw264.7的轉(zhuǎn)染,。按照standard condition,可以獲得50%的轉(zhuǎn)染效率；對于原代巨噬細胞或單核細胞、巨噬細胞衍生的巨噬細胞的DNA轉(zhuǎn)染,，應(yīng)選擇jetPEI-macrophage,。可以用jetOPTIMUS替代
質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染問題：
Q：當(dāng)我想在一個實驗中進行多個質(zhì)粒的共轉(zhuǎn)染時,，我該如何操作,？
A：對于多個質(zhì)粒的轉(zhuǎn)染，每孔DNA的總量不應(yīng)超過說明書中標明的DNA量,。每個質(zhì)粒的比例根據(jù)質(zhì)粒的大小,、結(jié)構(gòu)和期望的每個質(zhì)粒的表達水平來應(yīng)用。在每孔中,，每個質(zhì)粒至少應(yīng)占總DNA量的10%,。
復(fù)合物問題：
Q：jetPRIME®/DNA復(fù)合物可以穩(wěn)定多長時間,？
A：復(fù)合物形成的15-30分鐘內(nèi)是獲得最佳轉(zhuǎn)染效率的時間,。因此，對于需要較長孵育時間的高通量篩選,，推薦使用jetPEI進行HTS, 因為jetPEI®/DNA復(fù)合物可以穩(wěn)定長達4小時,。
病毒包裝問題：
Q：jetPRIME®是否適用于病毒包裝？
A：jetPRIME®可以用在傳統(tǒng)培養(yǎng)基中進行病毒包裝,。實際上,，在用于病毒包裝的常規(guī)細胞中，使用jetPRIME®的轉(zhuǎn)染效率可達90%,，例如HEK-293及其衍生株,，CHO, VERO,WOP和BHK細胞，因此會產(chǎn)生高病毒滴度（Dewannieux,M., Vernochet, C., Bartoscho, B., Cosset, F.L., Heidmann, T (2011).The mouseIAPE endogenous retrovirus can infect cells through any of the fiveGPI-anchored Ephrin A proteins., PLoS Pthog 7, e1002）.
細胞活性問題：
Q：如何提高脆弱細胞的細胞活性（例如,，原代成纖維細胞）,？
A：轉(zhuǎn)染對于細胞來說是創(chuàng)傷事件。改進細胞活性,，可參考以下建議：
-轉(zhuǎn)染后4小時更換培養(yǎng)基
-減少DNA的量
-減少jetPRIME®的體積
-在含血清的培養(yǎng)基中進行轉(zhuǎn)染
-轉(zhuǎn)染后24小時分析轉(zhuǎn)染效率而不是48小時
-確保使用jetPRIME® buffer稀釋jetPRIME和DNA
-檢測質(zhì)粒不含內(nèi)毒素
質(zhì)粒大小問題：
Q：使用jetPRIME®做DNA轉(zhuǎn)染會有質(zhì)粒大小的限制嗎,？
A：使用jetPRIME®做DNA轉(zhuǎn)染沒有質(zhì)粒大小的限制。然而,，記住同樣的DNA量,，大質(zhì)粒的基因拷貝數(shù)比小質(zhì)粒少。
siRNA問題:
Q：可以使用jetPRIME®轉(zhuǎn)染siRNA嗎,？
A：jetPRIME®完quan可以用于siRNA轉(zhuǎn)染,，使用終濃度10-50nm的siRNA。然而,，如果您主要感興趣的是siRNA轉(zhuǎn)染,，那么試劑INTERFERin®是您的選擇。
保存問題：
Q：jetPRIME®如何保存？
A：jetPRIME®是穩(wěn)定的分子,。室溫運輸jetPRIME®和它的buffer,，為長期保存，應(yīng)儲存在4°C,。
加熱問題：
Q：當(dāng)我收到jetPRIME®試劑時,，管子完quan是溫的。它是否仍然有效,，能否繼續(xù)使用,？
A：jetPRIME®是非常穩(wěn)定的分子。已經(jīng)做了測試jetPRIME試劑穩(wěn)定性的實驗,。jetPRIME®在50°C放置48小時后,，仍表現(xiàn)出和保存在4°C時相似的轉(zhuǎn)染效率。
冷凍問題：
Q：我不小心凍存了我的jetPRIME®試劑,，我該怎么辦,？
A：jetPRIME®可以耐受偶爾的冷凍，而不影響轉(zhuǎn)染效率,。然而,，對于長期保存來說，建議分裝并儲存在4°C,，以確保試劑長時間有效,。
有效期問題：
保存適當(dāng)時，jetPRIME®cat#114-01 (0.1mL)可以保存6個月,。其他規(guī)格的jetPRIME®至少可以保存1年,。
參考文獻問題：
Q：我在哪里可以找到科研人員已成功使用jetPRIME®發(fā)表的文章？
A：在Polyplusproduct citation database,可以找到引用jetPRIME和Polyplus-transfection公司其他試劑的科研論文,。
更多有關(guān)Polyplus轉(zhuǎn)染試劑jetPRIME®產(chǎn)品問題,，請聯(lián)系Polyplus轉(zhuǎn)染試劑jetPRIME®代理商——天津益元利康生物科技有限公司：
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