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血清使用常見(jiàn)問(wèn)題

閱讀:1341      發(fā)布時(shí)間:2023-2-24
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血清

血清是生長(zhǎng)和附著因子,、礦物質(zhì)、脂質(zhì)和激素的來(lái)源,,是細(xì)胞培養(yǎng)的重要組分,。血清調(diào)節(jié)細(xì)胞膜的通透性,同時(shí)能作為載體攜帶酶,、脂質(zhì),、酶和微量元素進(jìn)入細(xì)胞。

血清使用的常見(jiàn)問(wèn)題

Q1. 收到的血清有部分解凍的現(xiàn)象,,影響后續(xù)使用嗎,?

正常情況下,血清應(yīng)冷凍送達(dá),。但是如果血清部分解凍,,仍可繼續(xù)使用。血清在解凍后,,根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求分裝成單次用量后再進(jìn)行儲(chǔ)存以供后續(xù)使用,。

Q2. 血清需要避光保存嗎?

正常情況下,,在室內(nèi)或?qū)嶒?yàn)室燈光的照明下,,不影響血清的使用。但不建議將血清暴露在波長(zhǎng)短或強(qiáng)度高的光下,,因?yàn)檠逯?/span>含有一些對(duì)光敏感的成分,。

Q3. 血清必須熱滅活嗎?

熱滅活可以破壞血清中補(bǔ)體的活性,。哺乳動(dòng)物血清中存在的補(bǔ)體蛋白參與細(xì)胞的溶解,,收縮平滑肌,刺激細(xì)胞和血小板釋放組胺,,并激活淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞,。有研究比較了正常熱滅活胎牛血清對(duì)各種細(xì)胞株的生長(zhǎng)能力影響(如下圖所示),發(fā)現(xiàn)11株細(xì)胞中,,熱滅活對(duì)6株細(xì)胞有負(fù)面影響(紅框),、3株無(wú)影響(綠框)、2株有微弱正面改善(黃框),,因此在多數(shù)細(xì)胞培養(yǎng)中血清不需要熱滅活,,熱滅活對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)沒(méi)有明顯的促進(jìn)作用,反而還會(huì)影響血清質(zhì)量,使細(xì)胞的生長(zhǎng)速率降低,。因此如果不是非必須,,可不必做血清熱滅活這一處理。

圖片1.png

1 使用未滅活或滅活血清的細(xì)胞生長(zhǎng)狀況

Q4. 培養(yǎng)哪些細(xì)胞需要熱滅活血清,?

培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞(ESC),、平滑肌細(xì)胞、免疫細(xì)胞和昆蟲(chóng)細(xì)胞時(shí),,建議使用熱滅活血清,。

Q5. 血清如何熱滅活?

有研究表明,,熱滅活時(shí)若水浴溫度過(guò)高或加熱時(shí)間過(guò)長(zhǎng),,都會(huì)降低血清的性能,從而影響細(xì)胞生長(zhǎng)(如下圖23所示),。因此建議將血清加熱至56 °C,,持續(xù)30分鐘進(jìn)行熱滅活。

圖片2.png

2 使用不同溫度熱滅活血清對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響

圖片3.png

3 使用不同時(shí)間熱滅活血清對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響

注意:滅活時(shí),,若使用水浴槽,,請(qǐng)保持水面與血清液面等高。滅活后,,建議使用冷水浴降溫,。

Q6. 什么是γ-輻照血清?

γ-輻照是將血清暴露于25-35 kGy劑量的鈷-60源,,使病毒和支原體等其他微生物菌失活。γ-輻照不會(huì)降低血清的理化特性或細(xì)胞培養(yǎng)性能,。

Q7. FBS的顏色與之前的批次不一樣,。這會(huì)影響血清性能嗎?

血清中含有微量的血紅蛋白,,血清的顏色取決于血紅蛋白濃度,,顏色的深淺和血清的性能無(wú)關(guān)。


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