日韩av大片在线观看欧美成人不卡|午夜先锋看片|中国女人18毛片水多|免费xx高潮喷水|国产大片美女av|丰满老熟妇好大bbbbbbbbbbb|人妻上司四区|japanese人妻少妇乱中文|少妇做爰喷水高潮受不了|美女人妻被颜射的视频,亚洲国产精品久久艾草一,俄罗斯6一一11萝裸体自慰,午夜三级理论在线观看无码

CELLSCRIPT™的使命是提供好的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)品和技術(shù)，用于制造和使用RNA以便進(jìn)行臨床研究和治療的細(xì)胞翻譯,。

目前的產(chǎn)品包括多種體外轉(zhuǎn)錄試劑盒,、加帽類似物或加帽酶的5' RNA加帽試劑盒和3' RNA多聚腺苷酸化的試劑盒，以及用于轉(zhuǎn)錄,、加帽,、poly(A)尾mRNA以進(jìn)行翻譯的多合一試劑盒。

其中,，ScriptCap™ Cap 1 Capping System（C-SCCS1710）包含ScriptCap加帽酶,、ScriptCap 2'-O-甲基轉(zhuǎn)移酶、GTP和SAM等成分,，對體外轉(zhuǎn)錄的RNA進(jìn)行轉(zhuǎn)錄后加帽修飾,。Cap 0或Cap 1上限均可構(gòu)建，效率接近100%（這不能通過共轉(zhuǎn)錄加帽方法來完成）,。

ScriptCap加帽酶在體外催化具有5‘-三磷酸基的初級RNA的5’末端加成帽核苷酸,。“帽核苷酸"或“帽"是一種鳥嘌呤核苷,，它通過5‘C連接到一個(gè)三磷酸基團(tuán),，然后再連接到初級mRNA轉(zhuǎn)錄本中最多的5’核苷酸的5‘碳上，在大多數(shù)真核生物中,，帽核苷酸中鳥嘌呤7位的氮是甲基化的,。表示為：m7G(5')ppp(5')N1(pN)x-OH(3')。其中m7G代表N7-甲基鳥嘌呤核苷,，PPP代表帽子核苷的5’碳與初級RNA轉(zhuǎn)錄本的第一個(gè)核苷酸之間的三磷酸橋,，N1(PN)x-OH(3’)代表初級RNA轉(zhuǎn)錄本，其中N1是最多的5’核苷酸,。

ScriptCap加帽酶可依次催化三種不同的酶反應(yīng)：

(1) RNA三磷酸酶將RNA的5‘三磷酸裂解成二磷酸：

pppN1(p)Nx-OH(3')——ppN1(pN)x-OH(3') + Pi

(2) RNA鳥苷酸轉(zhuǎn)移酶將GTP連接到RNA最5‘核苷酸(N1)的5’二磷酸上：

ppN1(pN)x-OH(3') + GTP——G(5')ppp(5')N1(pN)x-OH(3') + PPi

(3) 鳥嘌呤-7-甲基轉(zhuǎn)移酶以S-腺苷甲硫氨酸(SAM或ADOMet)為輔因子,，催化帽核苷酸中鳥嘌呤7-氮的甲基化：

G(5')ppp(5')N1(pN)x-OH(3') + AdoMet——m7G(5')ppp(5')N1(pN)x-OH(3') + AdoHyc

這一過程被稱為“蓋帽"，與未蓋帽的RNA相比,，它提高了RNA的穩(wěn)定性和翻譯效率,。ScriptCap蓋帽酶構(gòu)建的封端RNA產(chǎn)物具有“0"帽結(jié)構(gòu)。在體外,，通過同時(shí)使用ScriptCap 2‘-O-甲基轉(zhuǎn)移酶和ScriptCap蓋帽酶,，可以將CAP0 RNA轉(zhuǎn)化為“CAP1"結(jié)構(gòu),。

ScriptCap 2‘-O-甲基轉(zhuǎn)移酶通過將供體分子SAM上的甲基轉(zhuǎn)移到CAP 0 RNA倒數(shù)第二個(gè)核苷酸的2’-O位，從CAP 0-RNA制備CAP1-RNA,，合成具有CAP 1結(jié)構(gòu)的RNA,。

Cap1 RNA可以進(jìn)一步提高mRNA的體內(nèi)翻譯效率，并有助于將mRNA標(biāo)記為相對于細(xì)胞內(nèi)免疫監(jiān)視機(jī)制的“自身RNA",。

ScriptCap1蓋帽系統(tǒng)提供了一種在IVT反應(yīng)中通過共轉(zhuǎn)錄蓋帽來制造蓋帽RNA的替代方案,，在IVT反應(yīng)中，用二核苷酸蓋帽類似物(例如m7GpppG)代替部分GTP,，如果RNA的5‘末端不是結(jié)構(gòu)化的,，使用ScriptCap 1蓋帽系統(tǒng)的蓋帽效率可以接近100%。相反,，由于CAP類似物與GTP競爭RNA聚合酶的轉(zhuǎn)錄啟動,，共轉(zhuǎn)錄的蓋帽效率受到CAP類似物的濃度及其與GTP濃度之比的限制。因此,，在轉(zhuǎn)錄反應(yīng)中使用CAP類似物蓋帽的RNA百分比總是小于100%,。在使用CAP類似物的共轉(zhuǎn)錄蓋帽反應(yīng)中可以產(chǎn)生的CAP RNA的量也受到降低GTP濃度以允許CAP類似物競爭轉(zhuǎn)錄起始的需要的限制。另一方面,，如果要蓋帽的RNA具有高度結(jié)構(gòu)的5‘末端,，則與CAP類似物共轉(zhuǎn)錄蓋帽可能是有益的。

優(yōu)勢：靈活進(jìn)行cap0和cap1的加帽,；效率JI高,，接近100％；同類產(chǎn)品可直接交叉使用以及價(jià)格合適,。

應(yīng)用：進(jìn)行體外mRNA的修飾,，用作體外蛋白表達(dá)系統(tǒng)和生理試驗(yàn)；前體mRNA的研究試驗(yàn)以及疫苗研究,。